"C6 epithelioid cells大鼠神經膠質瘤細胞系 細胞背景資料:膠質細胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導的大鼠膠質瘤克隆,并經過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。 當細胞從低密度生長到滿瓶時,S-100產量增加10倍。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。 GM637A細胞系相關產品:HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞 Nthy-ori 3-1細胞系相關產品:Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞 HEK 293T/17細胞系相關產品:SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞 細胞生長:貼壁 C6 epithelioid cells大鼠神經膠質瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2傳代 MPC 11細胞系相關產品:KLE細胞、H1105細胞、SEG-1細胞 L5178YR細胞系相關產品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞 Kit225細胞系相關產品:SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞 HSC4細胞系相關產品:H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞 GC-1 spg細胞系相關產品:NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 C6 epithelioid cells大鼠神經膠質瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 KMB-17細胞系相關產品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞 HCT116/L細胞系相關產品:PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞 hRPTC細胞系相關產品:PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞 LAD2細胞系相關產品:IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞 JIMT-1細胞系相關產品:TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞 GOS-3細胞系相關產品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 MDA-MB-231細胞系相關產品:KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞 G-401細胞系相關產品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞 Human Embryonic Skin細胞系相關產品:BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞 H-2195細胞系相關產品:H-226細胞、Hs683細胞、D324 Med細胞 C6 epithelioid cells大鼠神經膠質瘤細胞系 NCI-H2122細胞系相關產品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞 ACHN細胞系相關產品:HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞 HCC-1588細胞系相關產品:H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞 MPC-5細胞系相關產品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞 JROECL19細胞系相關產品:LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞 MADB106細胞系相關產品:JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞 MADB106細胞系相關產品:JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞 GM3569細胞系相關產品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞 Caov-4細胞系相關產品:IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞 P 815細胞系相關產品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞 SKml2細胞系相關產品:P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞 Hs294T細胞系相關產品:MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞 GM637A細胞系相關產品:HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞 HT-29細胞系相關產品:HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞 ME 180細胞系相關產品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞 Colo-678細胞系相關產品:SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞 NCI-H520細胞系相關產品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞 HGC27細胞系相關產品:SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞 UMC11細胞系相關產品:U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞 RBL細胞系相關產品:MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞 L5178-R細胞系相關產品:Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞 L5178-R細胞系相關產品:Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞 NTera 2細胞系相關產品:N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞 293 HEK細胞系相關產品:FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞 F-81細胞系相關產品:BIC細胞、WM266細胞、X63細胞 THLE-2細胞系相關產品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞 MXI細胞系相關產品:Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞 BJ [Human fibroblast]細胞系相關產品:H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞 MES-SA細胞系相關產品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞 Rat-2細胞系相關產品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞 ZR75_1細胞系相關產品:AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞 769-P細胞系相關產品:143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞 Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關產品:HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞 LAN6細胞系相關產品:TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞 COS-7細胞系相關產品:U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞 SKRC-39細胞系相關產品:H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞 MEC-1細胞系相關產品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞 MKN28細胞系相關產品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞 TB-1 Lu細胞系相關產品:Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞 ST-2細胞系相關產品:SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞 HHL-5細胞系相關產品:PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞 CMT-64細胞系相關產品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞 kms 11細胞系相關產品:Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞 SU-DHL-6細胞系相關產品:SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞 HCT-116細胞系相關產品:TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞 KOSC-2細胞系相關產品:OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞 MDA-MB231細胞系相關產品:SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞 751-NA細胞系相關產品:EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞 CAL148細胞系相關產品:Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞 NB-19細胞系相關產品:HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞 Kupffer細胞系相關產品:Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞 C6 epithelioid cells大鼠神經膠質瘤細胞系 HCC-78細胞系相關產品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞 RPMI 7951細胞系相關產品:X63.Ag8.653細胞、H-1876細胞、MDAMB-231細胞 HELA-GFP細胞系相關產品:251MG細胞、H-820細胞、YD38細胞 HRPEpiC細胞系相關產品:HDQ-P1細胞、WERI細胞、JG細胞 "
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