"P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：P１９細(xì)胞株是從C３H/He小鼠中誘導(dǎo)的惡性畸胎瘤中建立的。該細(xì)胞在含有０.１mM的培養(yǎng)基中可高效率地克隆。該細(xì)胞具有多能性，在５００nM維A酸誘導(dǎo)下可以分化成神經(jīng)和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞；在０.５%~１.０%二甲亞砜(DMSO)存在下，分化形成心臟和骨骼肌樣細(xì)胞，但不形成神經(jīng)或神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞；在DMSO和維A酸同時(shí)存在時(shí)，細(xì)胞的分化與只有維A酸一樣。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，并開啟超凈臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái)，以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時(shí)小心取用無(wú)菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無(wú)菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺(tái)過(guò)濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
MDA-MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細(xì)胞、A375S2細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞
Mono-Mac-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-NS細(xì)胞、OSA細(xì)胞、P 815細(xì)胞
HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞
RCC_7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2 OS細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞、OLN93細(xì)胞
aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
MDA-MB-435 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2細(xì)胞、DHL6細(xì)胞、INS1E細(xì)胞
SUM149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞
BIC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1048細(xì)胞、TR 146細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞
SKMEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞
Panc-05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1353細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞
PANC-10-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-878細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞
CMT93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞
P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3570細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、BSC1細(xì)胞
SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM1900細(xì)胞、MES 13細(xì)胞、769P細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
OC 316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539 BT細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞
CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞
CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞
OCI-LY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞、HIT細(xì)胞
P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU8686細(xì)胞、KG-1細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞
F-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC細(xì)胞、WM266細(xì)胞、X63細(xì)胞
JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞
PL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN-1細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞
MARC145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRH-0201細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細(xì)胞、A2780細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
Panc2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2-C8細(xì)胞、U266BL細(xì)胞、C 6細(xì)胞
L-M[TK-]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細(xì)胞、H2286細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞
SW1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-16細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞、L細(xì)胞
M059J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞
T-ALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞
SP-2/0-AG14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細(xì)胞、MN60細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞
KU1919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC9細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞
SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
QGP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞
KHYG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates 1B細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞、H2172細(xì)胞
KU1919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC9細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
NCI-H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH 77細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞
MM1-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞
MUGCHOR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
MHCC-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343細(xì)胞、LL2細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞
M-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEEpiC細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
P19 Thawing小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
LS 174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞
BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kupffer細(xì)胞、Y1細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞
SKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGMC細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞、L cells細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
SVG(P12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH1細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞
HO8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC-11-TKB細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞
HuH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H747細(xì)胞、Wien133細(xì)胞、AKR細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
Leukemic 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2108細(xì)胞、H-1693細(xì)胞、Co320細(xì)胞
HCC-2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE-1細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞
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