"P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:P19細(xì)胞株是從C3H/He小鼠中誘導(dǎo)的惡性畸胎瘤中建立的。該細(xì)胞在含有0.1mM的培養(yǎng)基中可高效率地克隆。該細(xì)胞具有多能性,在500nM維A酸誘導(dǎo)下可以分化成神經(jīng)和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞;在0.5%~1.0%二甲亞砜(DMSO)存在下,分化形成心臟和骨骼肌樣細(xì)胞,但不形成神經(jīng)或神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞;在DMSO和維A酸同時(shí)存在時(shí),細(xì)胞的分化與只有維A酸一樣。
UMUC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞
HT22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞
SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1648細(xì)胞、H-460細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會臨時(shí)要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細(xì)胞、HCA7細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞
Hs852細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP1細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞
H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞
SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細(xì)胞、MEF細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
GM03190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞
ASH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、MM1細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞
HEYA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675T細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞、FET細(xì)胞
KPL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞
MCF12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞、GC-2細(xì)胞
NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞
L-1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞、MJ細(xì)胞
P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
H22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 70細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞
CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
NMCG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
BSC-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/9細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞
INS1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞
INS1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞
Epstein-Barr-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞
H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8402細(xì)胞、TE-10細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
PC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞、KM933細(xì)胞
MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞
SUDHL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92-MI細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞
CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
RPMI #8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:He La細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
HCC1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE280細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞、SKO3細(xì)胞
Hmy.2 CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c3T3細(xì)胞、NE1細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
MDA-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5細(xì)胞、KY180細(xì)胞、M4e細(xì)胞
BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2OS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞
H 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
SK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-206F細(xì)胞、SW 756細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞
870細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞
MOLM13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞
NS20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-782細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞
BC-023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞
L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞
RAG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、CD18細(xì)胞
SNU-484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞
MRC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-1細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞
P19 Cell:小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
MV4II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞
WEHI 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細(xì)胞、H1793細(xì)胞、H647細(xì)胞
HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞
H-1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞
2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞
H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞
UCLA RO-81-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞
NCI-H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細(xì)胞、TALL1細(xì)胞、H-226細(xì)胞
MDAMB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細(xì)胞、BC-023細(xì)胞、IM9細(xì)胞
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
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