"P19 epithelioid cells小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：P１９細(xì)胞株是從C３H/He小鼠中誘導(dǎo)的惡性畸胎瘤中建立的。該細(xì)胞在含有０.１mM的培養(yǎng)基中可高效率地克隆。該細(xì)胞具有多能性，在５００nM維A酸誘導(dǎo)下可以分化成神經(jīng)和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞；在０.５%~１.０%二甲亞砜(DMSO)存在下，分化形成心臟和骨骼肌樣細(xì)胞，但不形成神經(jīng)或神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞；在DMSO和維A酸同時(shí)存在時(shí)，細(xì)胞的分化與只有維A酸一樣。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞
OUMS27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-177細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞
SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52-PE細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、CAMA細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
P19 epithelioid cells小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
GOS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH660細(xì)胞、H-28細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞
SNU886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞
HKC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
P19 epithelioid cells小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
MCA-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞
DK-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細(xì)胞、NRCC細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞
RPMI8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TERT-RPE1細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞
WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞
H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞
H-647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞
Capan2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞
SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞
SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
P19 epithelioid cells小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
NGP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細(xì)胞、K299細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞
SKHEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT-8細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞
hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞
Mahlavu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag14細(xì)胞、MB468細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞
P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞
P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
H-1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞、U343MG細(xì)胞
H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞
LLC-MK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞
JB6 Cl 30-7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL-1細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞
B-cell with DC Morphology細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
mIMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-023細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞
SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞
LP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞、AML12細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
IPLB-SF-21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL24細(xì)胞、SCC154細(xì)胞、JC細(xì)胞
KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
Lieming Xu-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC細(xì)胞、H810細(xì)胞、U251n細(xì)胞
SCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞
TE-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
NCIH187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774.A1細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞
UMR106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞
CMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1573細(xì)胞、JHH2細(xì)胞、mREC細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
H-1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-6細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞、AML-193細(xì)胞
LP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞、AML12細(xì)胞
ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞
MLTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV3細(xì)胞、HemECs細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞
P3J HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219C細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞
CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 92.1.7細(xì)胞、526-mel細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞
OSC-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞
CBRH-7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-S細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞、BT20細(xì)胞
SKOV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 3細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞、G-292細(xì)胞
TCMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-02細(xì)胞、LM1細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞
MT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞
P19 epithelioid cells小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞系
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細(xì)胞、C22細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
THP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-226細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞
RPMI8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TERT-RPE1細(xì)胞、Fu97細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞
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