"Caki-2 Thawing人腎透明細胞癌細胞系
細胞背景資料：該細胞源自一位６９歲白人男性的初期腎腺癌組織
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
Caki-2 Thawing人腎透明細胞癌細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因導致，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Caki-2 Thawing人腎透明細胞癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要)，關鍵所在是細胞來源，血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
BNL CL2細胞系相關產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
D324 Med細胞系相關產(chǎn)品：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
Colon26細胞系相關產(chǎn)品：ABE8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
CTX TNA2細胞系相關產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
SJSA-1細胞系相關產(chǎn)品：PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
H-2228細胞系相關產(chǎn)品：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
CAL 51細胞系相關產(chǎn)品：Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
BIU87細胞系相關產(chǎn)品：H2591細胞、NCI-H358細胞、HSAEC1-KT細胞
SNU-449細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
OCI AML4細胞系相關產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
NCM460細胞系相關產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
KMH-2細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly1細胞、SJRH-30細胞、aTC1 Clone 6細胞
WEHI 164細胞系相關產(chǎn)品：HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞
MCF7ADR細胞系相關產(chǎn)品：SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
HTR8細胞系相關產(chǎn)品：JHH2細胞、SGC-7901細胞、NIH3T3細胞
293/EBNA-1細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_FI細胞、A72細胞、T-98G細胞
OVCAR4細胞系相關產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
Detroit 562細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
G361-mel細胞系相關產(chǎn)品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
NCI-H1105細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
SNU423細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞
CACO2細胞系相關產(chǎn)品：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
H-2591細胞系相關產(chǎn)品：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
SIRC細胞系相關產(chǎn)品：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
R1800[RA]細胞系相關產(chǎn)品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
Caki-2 Thawing人腎透明細胞癌細胞系
KRCY細胞系相關產(chǎn)品：MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞
HOC-1細胞系相關產(chǎn)品：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞
C518細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞
MDAMB175細胞系相關產(chǎn)品：FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞
Calu3細胞系相關產(chǎn)品：PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
D341細胞系相關產(chǎn)品：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
Hep G2-Luc細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
OCI AML4細胞系相關產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
QBC(939)細胞系相關產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞
C3H 10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞
SF-295細胞系相關產(chǎn)品：HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞
DMS-273細胞系相關產(chǎn)品：Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
A-375.S2細胞系相關產(chǎn)品：LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
MSTO211H細胞系相關產(chǎn)品：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
SK-ML2細胞系相關產(chǎn)品：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
2BS細胞系相關產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
NCI-H747細胞系相關產(chǎn)品：C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
SKMEL-1細胞系相關產(chǎn)品：Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
DMS153細胞系相關產(chǎn)品：PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
LMTK-細胞系相關產(chǎn)品：ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞
H508細胞系相關產(chǎn)品：ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
LAN-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
DI TNC1細胞系相關產(chǎn)品：H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞
SVG(P12)細胞系相關產(chǎn)品：BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞
8305-C細胞系相關產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
HEK 293 EBNA細胞系相關產(chǎn)品：Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞
HM細胞系相關產(chǎn)品：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
KLE細胞系相關產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞
NIH3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品：KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
LM3細胞系相關產(chǎn)品：HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
H2023細胞系相關產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
JROECL33細胞系相關產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
SW 620細胞系相關產(chǎn)品：H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞
Caki-2 Thawing人腎透明細胞癌細胞系
NCIH1651細胞系相關產(chǎn)品：KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
C2-C12細胞系相關產(chǎn)品：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
MAC1細胞系相關產(chǎn)品：MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
HCT FET細胞系相關產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
U-251MG細胞系相關產(chǎn)品：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
SP-2細胞系相關產(chǎn)品：FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
ESC-410細胞系相關產(chǎn)品：HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
INS1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關產(chǎn)品：Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞
RL95細胞系相關產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
MC3T3-E細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
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