"Caki-2細(xì)胞：人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自一位６９歲白人男性的初期腎腺癌組織
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
解凍細(xì)胞出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細(xì)胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細(xì)胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；２)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大小：一般解決方案是一些細(xì)胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細(xì)胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細(xì)胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個實(shí)驗(yàn)。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
KYSE 510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞
SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
A549 ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC1細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞
PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞
HM1900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636.T細(xì)胞、RFL6細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞
SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
MDA-MB-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H23細(xì)胞、QSG7701細(xì)胞、H-1930細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞
MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞
MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞
NCI-H1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC-6細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞、RPE1細(xì)胞
MC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-21細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞
HOS(TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAVSMC細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞
UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞
UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
IPEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞
Caco-2/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細(xì)胞、R D細(xì)胞、SUD4細(xì)胞
Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞
CCF-STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2J細(xì)胞、ME 180細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞
TMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU3細(xì)胞、SF 295細(xì)胞、BOWES細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞
58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞
H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1437細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、SW 48細(xì)胞
U266 B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細(xì)胞、NHA細(xì)胞、H920細(xì)胞
C4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80UBC細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞
SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞
VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞
OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
SK-Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞、Murine Leydig Tumor細(xì)胞：-1細(xì)胞
Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞
OVCAR 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM/S細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞、JIMT細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞
MDCC MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA-144細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞
Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞
H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞
OUMS23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA795細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞
Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞
DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞
GM03569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞、BV2細(xì)胞
K1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H 10T1/2細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞、LI7細(xì)胞
YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞
LS-1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2107細(xì)胞、OsACL細(xì)胞、A 549細(xì)胞
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB361細(xì)胞、SW-837細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞
C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
HCC1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 21細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞、DMS53細(xì)胞
Jeko1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞
SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞
Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞
hFOB1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Helacyton gartleri細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞、Ramos細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
HSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞
GM01232E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞
HCV29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS9L細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
L5178YR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞
COLO 206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1650細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞
NKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-SVEC01細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞
CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mino細(xì)胞、H676B細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
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