"786-O Thawing人腎透明細胞腺癌細胞系
細胞背景資料:該細胞源自一位原發(fā)性腎透明細胞癌患者。該細胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂上生長。此細胞生成一種PTH(甲狀旁腺素)樣的多肽,與乳癌和肺癌中生成的肽相似,其N端序列與PTH相似,具有PTH樣活性,分子量為6000D。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
786-O Thawing人腎透明細胞腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
786-O Thawing人腎透明細胞腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液;2)吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?!痉盅b稀釋細胞操作】1)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標記;2)分裝:將細胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
SK-UT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞
H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
UMNSAH-DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC10細胞、BE(2)-M17細胞、CAL-12T細胞
OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
HCT/Taxo1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
GP293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
NCI H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
WC00059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232細胞、HcaF細胞、C643細胞
NCI-H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rh30細胞、3AO細胞、NCIH187細胞
KMST-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
E0771細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、BC-3-H-I細胞、kms 11細胞
NUGC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞
KYSE 510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
KYSE 510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
NCI-H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
SO-Rb 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
L428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
786-O Thawing人腎透明細胞腺癌細胞系
KYSE-150細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
38C13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
ESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞
Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP 1細胞、IGR-OV1細胞、BHK-21細胞
HG2855細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
QG-56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞
H1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞
LN 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞
4T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
HK-2 [Human kidney]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
C57 Mouse Tumor 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3細胞、MDAPCa2b細胞、RT-4細胞
DSL-6A-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細胞、SW-1271細胞、HMEC細胞
GLC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
KU19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞
OVCA432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞
CEM T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞
SNUC2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
U-226AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
BHP10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞
786-O Thawing人腎透明細胞腺癌細胞系
Caki-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞
COR-L88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞
NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
OCI-Ly 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞
PLC-PRF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
ABE8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞
HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
CMT64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
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