"ND7/23 Adherent鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：神經(jīng)母細胞瘤
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
ND7/23 Adherent鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞
OCI-Ly 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞
HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
細胞生長特性：貼壁
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
HEK293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞
EVSAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
QG56細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞
NCI-H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞
HPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞
AR4-IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
H-510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
GM01232E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
ND7/23 Adherent鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
HG2855細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞
M059J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞
NCI-H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
SCL-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
CCC-HPF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
MESSA-DX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
OVCAR-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
NCIH740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
LNT-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
OVCAR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
RS4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
MGH-U1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞
NW38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
CAMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
HCO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
NUGC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL-2細胞、CF-1 MEF細胞、Be-Wo細胞
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
EFM192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8-653細胞、HSC（Human Schwann）細胞、SU-DHL-8細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
Z138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
H-2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
ND7/23 Adherent鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
mIMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
GA-10 (Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞
HuH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞
LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細胞、Hs888T細胞、NR8383.1細胞
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細胞、Jurkat-E6細胞、He-La細胞
EVSAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB49細胞、MCF7-CTRL細胞、HuH6細胞
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