"ND7/23 Cell:鼠神經母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:神經母細胞瘤
HONE1細胞系相關產品:T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
LK 2細胞系相關產品:MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
H-1734細胞系相關產品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
TE 671細胞系相關產品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
ND7/23 Cell:鼠神經母細胞瘤細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內,培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關于培養(yǎng)瓶內加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現生長速度快的細胞在玻璃瓶內生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內的生長狀態(tài)也比內好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數,傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
Jiyoye(P-2003)細胞系相關產品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
RPMI 1788細胞系相關產品:Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關產品:NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
kms 11細胞系相關產品:Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
HCC2157細胞系相關產品:IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
細胞生長特性:貼壁
ND7/23 Cell:鼠神經母細胞瘤細胞系
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
MOLM13細胞系相關產品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
NCIH146細胞系相關產品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
MHCC97-H細胞系相關產品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
HL 60細胞系相關產品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
SW-1222細胞系相關產品:SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
EAHY-926細胞系相關產品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
NCI-H1341細胞系相關產品:SNU-407細胞、Case 3細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞
ND7/23 Cell:鼠神經母細胞瘤細胞系
HUCCT1細胞系相關產品:Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
COV362細胞系相關產品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
4T1-LUC細胞系相關產品:HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
PLC細胞系相關產品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
H508細胞系相關產品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
EL-4細胞系相關產品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
SCC15細胞系相關產品:H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
HCCLM3細胞系相關產品:HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
DU 4475細胞系相關產品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
DU 4475細胞系相關產品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
WEHI 231細胞系相關產品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
U373 MG細胞系相關產品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
WEHI-3B細胞系相關產品:Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞
Kit-225-K6細胞系相關產品:OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
COLO357細胞系相關產品:NCI-H810細胞、WM-239-A細胞、Anip-973細胞
OK細胞系相關產品:Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞
Panc 02細胞系相關產品:T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
MLE-12細胞系相關產品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
L-cell細胞系相關產品:MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
Pt K2細胞系相關產品:Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
NCI-H1437細胞系相關產品:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
MHCC97H細胞系相關產品:Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
PAN 02細胞系相關產品:MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
E.L.4細胞系相關產品:HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
HeLa細胞系相關產品:Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞
CHP 100細胞系相關產品:PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
MDCK-2細胞系相關產品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
HMEL細胞系相關產品:Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞
RBMEC細胞系相關產品:mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
CCRF.CEM細胞系相關產品:OCIAML2細胞、SUDHL-16細胞、Hs 688(A).T細胞
WB F344細胞系相關產品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
COS-1細胞系相關產品:OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
HMEC1細胞系相關產品:LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞
SRA01/04細胞系相關產品:SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
UC-3細胞系相關產品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
U251n細胞系相關產品:IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
CNE1-LUC細胞系相關產品:TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
MDA-361細胞系相關產品:MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
CACO2細胞系相關產品:PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
NCI-H1770細胞系相關產品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
SAOS 2細胞系相關產品:EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
G361細胞系相關產品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
ND7/23 Cell:鼠神經母細胞瘤細胞系
U251n細胞系相關產品:IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
RCS細胞系相關產品:A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞
HO1-N-1細胞系相關產品:143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
3T3-J2細胞系相關產品:Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關產品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
KU 812細胞系相關產品:A9 (Hamprecht)細胞、SK-MEL-28細胞、SKUT-1細胞
Hs840_T細胞系相關產品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
SK HEP 01細胞系相關產品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
CAMA1細胞系相關產品:HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
SUD4細胞系相關產品:HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關產品:P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
EFM-192A細胞系相關產品:H524細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、ZYM-SVEC01細胞
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關鍵字: ND7/23 Cell:鼠神經母細胞瘤細胞系
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