"PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系
細胞背景資料:逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞;雄性;NIH Swiss
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。
OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
SHZ-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
HSC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
B16BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
EVSA/T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
OV433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMO6細胞、SH-SY5Y細胞、RSC96細胞
細胞生長特性:貼壁
PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
CCC-HPF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
GM02219D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
MRCV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞
SJRH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
MALME.3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
EA hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
MCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB(HCF)細胞
U87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞
WC00059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
WC00059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞
NALM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
P30OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
SUP T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
Hs 578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞
DMS-273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
SCL-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
U-87MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞
HNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞
95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
SUSM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞
NCI-H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
CNE-2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
NPC-TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
ZR75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
NCIH661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
NCI-H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
MMAc.SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系
Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
H-838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
MDA-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
H-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH91細胞、NCI-H125細胞、KLM1細胞
GH 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
MADB106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG3細胞、MFE280細胞、J774A.1細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 039細胞、MDCKII-WT細胞、COLO-679細胞
GM02219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 10A細胞、Line 207細胞、LCLC103H細胞
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