"PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞;雄性;NIH Swiss
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細(xì)胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。
OsA-CL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE11細(xì)胞、TE6細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞
SHZ-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF382細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
OV433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMO6細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞、RSC96細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
B16/F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/ag細(xì)胞、SW-839細(xì)胞、ATN1細(xì)胞
CCC-HPF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rHSC-99細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
PNT1-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL4細(xì)胞、GC-1細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
MRCV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H524細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞、D-283細(xì)胞
SJRH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、746T細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞
EA hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
HB611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB(HCF)細(xì)胞
U87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC1005細(xì)胞、ECC10細(xì)胞、RCM1細(xì)胞
WC00059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞
WC00059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞
87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888 Lu細(xì)胞、KU.812細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞
NH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞
Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞
SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞
Bowes melanoma cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1187細(xì)胞、Panc327細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞
451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞
SUP T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細(xì)胞、MT-2細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
KG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞
MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞
P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2008細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞
CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞
NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞
Hs 578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1171細(xì)胞、Tu686細(xì)胞、J82細(xì)胞
DMS-273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840_T細(xì)胞、2780細(xì)胞、201T細(xì)胞
SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞
OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞
Liver-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-4細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞
OVCAR 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細(xì)胞、GM01232細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞
U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞
HNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞
95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
SUSM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 527細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞、Eca109細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
CNE-2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞
NCI-H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細(xì)胞、H676細(xì)胞、VSMC細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
PT67 Adherent小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞
H-838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細(xì)胞、ACC3細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞
MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
H-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH91細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞、KLM1細(xì)胞
GH 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLCL9B10細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞
LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
MADB106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞
CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 039細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 10A細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
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