"PT67 epithelioid cells小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞;雄性;NIH Swiss 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! TE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC316細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞 GRSL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta519細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞 GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 PT67 epithelioid cells小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來(lái)細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進(jìn)展,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個(gè)院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜,需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多,下面就一些動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對(duì)細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代;內(nèi)毒素含量過(guò)高,會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺(tái)/生物安全柜:細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時(shí),一般需要在100級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行,因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細(xì)胞的凍存過(guò)程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過(guò)夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時(shí)就必須配備一臺(tái)-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月,對(duì)于不需要長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞,可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細(xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī):細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞,所以需要配置低速的常溫離心機(jī),對(duì)于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞 HCE-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-8_13細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞 R3/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞、HSC2細(xì)胞 Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞 Ra #1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-10細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞、H-1781細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 PT67 epithelioid cells小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說(shuō)明書 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞 NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞 5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞 COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞 PK(15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW403細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞、BGC823細(xì)胞 697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞 KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3.1細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、H-1404細(xì)胞 LO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞 C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞 G-292 clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB2細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞、LLC1細(xì)胞 PT67 epithelioid cells小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系 NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞 Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞 hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞 MGHU3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT.4細(xì)胞、WM-115細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞 COLO201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 4475細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞 SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞 SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞 H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞 EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞 A2780/CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375SM細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞 MG-63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞、FK81細(xì)胞 KAT-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞 hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞 MOLT16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A1細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞 3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞 H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細(xì)胞、T-84細(xì)胞、PLA802細(xì)胞 MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞 HCC0044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4 I細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞、VERO76細(xì)胞 JB6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞 NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞 LC1/Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞 HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細(xì)胞、M21細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞 Monomac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2228細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞、SUM190細(xì)胞 SUD-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞 CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU 1細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞 J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞 hTERT-RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAS細(xì)胞、MASMC細(xì)胞、TE32細(xì)胞 H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞 Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞 SF 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/BL6細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞、SUM102細(xì)胞 H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞 IMR 90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞 TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞 Hs 870.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞 Colon-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細(xì)胞、PM6細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞 RKOAS451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、H-2141細(xì)胞、H-820細(xì)胞 MC57細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、NPA細(xì)胞 MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞 FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞 MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞 T/GHA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞 HMCB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞 H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞 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