"PT67 Cell:小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:逆轉錄病毒包裝細胞;雄性;NIH Swiss
Namalwa細胞系相關產品:A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
FRhK4細胞系相關產品:NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞
LN299細胞系相關產品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
Hs 578.Bst細胞系相關產品:H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PT67 Cell:小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現,用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
CCRFCEM細胞系相關產品:MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞
HuO9細胞系相關產品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
FUOV1細胞系相關產品:COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞
SK N SH細胞系相關產品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
COLO-1細胞系相關產品:Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞
細胞生長特性:貼壁
PT67 Cell:小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
HSC(Human Schwann)細胞系相關產品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞
RC92A細胞系相關產品:NCIH1648細胞、CCC-HEH-2細胞、HUT 125細胞
L929(NCTC)細胞系相關產品:C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
Med 341細胞系相關產品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
NCTC929細胞系相關產品:OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
JCA1細胞系相關產品:NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
Colon 26細胞系相關產品:Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
PT67 Cell:小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
Panc02細胞系相關產品:P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞
Hs-940細胞系相關產品:UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關產品:OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞
Hs-688A-T細胞系相關產品:LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞
H-716細胞系相關產品:CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞
SUP-B1細胞系相關產品:RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
MSCs(mUCMSCs)細胞系相關產品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
COLO-320DM細胞系相關產品:NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
QGP1細胞系相關產品:NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞
QGP1細胞系相關產品:NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞
SVHUC細胞系相關產品:H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
SUPB-15細胞系相關產品:CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
HEMCSS細胞系相關產品:STTG1細胞、SKCO 1細胞、RL95細胞
Kit225-K6細胞系相關產品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
H295R-S1細胞系相關產品:AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
NCI.H226細胞系相關產品:HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
RKO_AS45細胞系相關產品:NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
LC2/Ad細胞系相關產品:RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
SNU1040細胞系相關產品:16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
HUT-226細胞系相關產品:RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
U-343-MG細胞系相關產品:OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
SW-1783細胞系相關產品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
NKM1細胞系相關產品:ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
L-6 myoblast細胞系相關產品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
MKN-7細胞系相關產品:KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
Walker256細胞系相關產品:NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
HTR8svn細胞系相關產品:HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞
MCA 205細胞系相關產品:SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞
E.L.4細胞系相關產品:HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
GS-9L細胞系相關產品:BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
TGW細胞系相關產品:Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
FLC-7細胞系相關產品:B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞
SK LU 1細胞系相關產品:EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
HCV 29細胞系相關產品:Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
SK LU 1細胞系相關產品:EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
CCFSTTG1細胞系相關產品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
HUC-1細胞系相關產品:NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
NCI-H1666細胞系相關產品:Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
CII細胞系相關產品:MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞
Tsup-1細胞系相關產品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
Tsup-1細胞系相關產品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
SNG-M細胞系相關產品:SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞
NCI-H841細胞系相關產品:BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞
PT67 Cell:小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關產品:H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
HCT 116細胞系相關產品:H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞
HCC202細胞系相關產品:NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關產品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
DMS53細胞系相關產品:Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關產品:B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關產品:NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
hTERT-HME1細胞系相關產品:A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
NOMO1細胞系相關產品:Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞
Vero 76細胞系相關產品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
HEMCSS細胞系相關產品:STTG1細胞、SKCO 1細胞、RL95細胞
Tb 1-Lu細胞系相關產品:BNL-HCC細胞、SF767細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
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關鍵字: PT67 Cell:小鼠逆轉錄病毒包裝細胞系
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