"HEK293T/17 Adherent人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚腎；５型腺病毒及SV４０轉(zhuǎn)化；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HEK293T/17 Adherent人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞
MDA361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞
A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞
MA 104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHHA-1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
HEK293T/17 Adherent人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞
Granta519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE15細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞
HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
SPC-A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H548細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞
RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞
LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、T-98G細(xì)胞
SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
Vero 76 clone E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞
MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞
RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞
U87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞
HEK293T/17 Adherent人胚腎細(xì)胞系
PLC-PRF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞
Panc-08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-I細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
MKN74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞
IMR-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞、MIN6細(xì)胞
OVCAR420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞、SF767細(xì)胞
RFL 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 325細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞、SUM52細(xì)胞
G-401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH889細(xì)胞、OC316細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞
SCLC21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞
NP69SV40T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3E1細(xì)胞、HOEC細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
MDA-MB-134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML3細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞
NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞
H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞
MBT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞
PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞
2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞
Fao細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #8226細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞
801-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC1細(xì)胞、Panc02細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞
MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞
CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞
KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞
SK Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 5細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞、SW-579細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
DAKIKI Clone 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
C-4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細(xì)胞、YH-13細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞
NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞
JROECL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
HS-294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞
HEK293T/17 Adherent人胚腎細(xì)胞系
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
HuP-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞
U87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞
W256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞
Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞
Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞
SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mac-1細(xì)胞、EU-4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞
UMRC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞
SUM 159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8-D1A細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞
HCC-1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10A細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、7860細(xì)胞
"