"HEK293T/17 Adherent人胚腎細胞系
細胞背景資料:胚腎;5型腺病毒及SV40轉化;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HEK293T/17 Adherent人胚腎細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
Panc4.03細胞系相關產品:RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞
MDA361細胞系相關產品:HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
A1847細胞系相關產品:NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H2198細胞系相關產品:Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
L5178-R細胞系相關產品:Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞
MA 104細胞系相關產品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
細胞生長特性:貼壁
HEK293T/17 Adherent人胚腎細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
H446細胞系相關產品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
Granta519細胞系相關產品:TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
HCC1171細胞系相關產品:Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
NCIH1436細胞系相關產品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
Kit225-K6細胞系相關產品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
SPC-A1細胞系相關產品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
RN細胞系相關產品:SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
LM2-4175細胞系相關產品:Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
SIRC細胞系相關產品:YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關產品:SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
MDA-MB 453細胞系相關產品:LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
RIN-m細胞系相關產品:MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞
U87MG細胞系相關產品:OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞
HEK293T/17 Adherent人胚腎細胞系
PLC-PRF-5細胞系相關產品:NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞
Panc-08.13細胞系相關產品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
COLO 16細胞系相關產品:EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞
MKN74細胞系相關產品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
IMR-90細胞系相關產品:LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
OVCAR420細胞系相關產品:SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
RFL 6細胞系相關產品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
G-401細胞系相關產品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
SCLC21H細胞系相關產品:OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
NP69SV40T細胞系相關產品:MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
HVSMC細胞系相關產品:OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
MDA-MB-134VI細胞系相關產品:OCI-AML3細胞、LM-TK-細胞、NCI-H2087細胞
WM-115細胞系相關產品:NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
NCI-H1944細胞系相關產品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
KTCTL140細胞系相關產品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
H-2291細胞系相關產品:SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞
MBT2細胞系相關產品:PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞
LA-N-5細胞系相關產品:Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
PCI:SG231細胞系相關產品:NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
2B4細胞系相關產品:MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
Fao細胞系相關產品:RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
801-D細胞系相關產品:IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
MSB-1細胞系相關產品:WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞
CCC-ESF-1細胞系相關產品:H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞
LC1sq細胞系相關產品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
MLMA細胞系相關產品:NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
L-Wnt-3A細胞系相關產品:MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
KRC Y細胞系相關產品:L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
SK Mel 1細胞系相關產品:OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
BALL-1細胞系相關產品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
DAKIKI Clone 1細胞系相關產品:A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
SKES-1細胞系相關產品:EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
C-4I細胞系相關產品:BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
NCI-SNU-475細胞系相關產品:PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞
HT55細胞系相關產品:SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
P3X63Ag8細胞系相關產品:HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
SEG1細胞系相關產品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關產品:MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關產品:OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關產品:SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
JROECL33細胞系相關產品:LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
HS-294細胞系相關產品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
HEK293T/17 Adherent人胚腎細胞系
FDC-P1細胞系相關產品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
HuP-T3細胞系相關產品:SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
U87MG細胞系相關產品:OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞
W256細胞系相關產品:HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關產品:NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞
Microbiological Associates-104細胞系相關產品:HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞
SNU-668細胞系相關產品:Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞
UMRC-2細胞系相關產品:RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
SNU449細胞系相關產品:BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關產品:HPDE細胞、Mhh-Call 2細胞、JROECL33細胞
SUM 159細胞系相關產品:C8-D1A細胞、SNT-8細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
HCC-1171細胞系相關產品:MCF-10A細胞、MDCK細胞、7860細胞
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