"HEK293T/17 epithelioid cells人胚腎細胞系 細胞背景資料:胚腎;5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! MyLa 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞 Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞 HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞 細胞生長:貼壁 HEK293T/17 epithelioid cells人胚腎細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HEK293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞 NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞 hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞 D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞 HEK 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HEK293T/17 epithelioid cells人胚腎細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 MeT-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-549細胞、SK-ES1細胞、PANC 327細胞 RC13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞 Psi-2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞 NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞 FRH-0201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞 WM239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞 HEK 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞 LNCaP FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞 SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞 RCC23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞 HEK293T/17 epithelioid cells人胚腎細胞系 C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞 J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞 GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞 ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞 HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞 PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞 PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞 SK-MEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞 THC-8307細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 123細胞、SW-403細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞 MHCC97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞 MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞 RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞 PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞 Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞 Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞 He-La細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞 NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞 KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞 Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞 SW 900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞 H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞 SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞 FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞 NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞 SNU251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞 RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞 Z138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞 H-1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-3細胞、MLMEC細胞、CPA47細胞 NBL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞 Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞 32D.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞 HCC-827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞 NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞 K7M2 wt細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞 HS578細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞 Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞 EAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞 Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞 Hs-611-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞 CMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞 ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞 A2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG1細胞、Sf21細胞、CCD 841 CoTr細胞 BV-173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞 BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞 HUV-EC-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞 FK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞 HFT-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞 RPVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞 Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞 JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞 H-727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293A細胞、U251細胞、PK-13細胞 HEK293T/17 epithelioid cells人胚腎細胞系 Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞 ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、UO-31細胞、Kit225-K6細胞 A 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-SRA 01/04細胞、HCCLM6細胞、RTE細胞 Psi-2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC-E2G8細胞、SiHa細胞、LLC-PK(1)細胞 "
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