"HEK293T/17 Cell:人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:胚腎;5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化;女性
RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞
NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
SKHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HEK293T/17 Cell:人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
H-1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞、AML-193細(xì)胞
C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLM8細(xì)胞、TE13細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
HEK293T/17 Cell:人胚腎細(xì)胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
CD18/HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-9細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
JB 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1417細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞、FC33細(xì)胞
SKMES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞、SW-982細(xì)胞
HEK293T/17 Cell:人胚腎細(xì)胞系
MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞
MKN 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞
A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞
H7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞
MDA-MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hUC-MSC細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞
MDA-MB-435 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2細(xì)胞、DHL6細(xì)胞、INS1E細(xì)胞
Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細(xì)胞、H-748細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞
Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細(xì)胞、H-748細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
FRTL-5 Cl 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8.653細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞
KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu6細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞
MPC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細(xì)胞、MC 116細(xì)胞、H1355細(xì)胞
LN 382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
NKL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞
PC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞、KM933細(xì)胞
AGS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma 261細(xì)胞、B 95.8細(xì)胞、H-596細(xì)胞
W256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞
Pa14C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD 1細(xì)胞、HL7702細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞
HLEC-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 16細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細(xì)胞、JB 6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞
SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞
SO-RB50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞
beta TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞
MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞
FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞
MUM2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細(xì)胞、H-187細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞
COR-L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細(xì)胞、MC/9細(xì)胞、LM8細(xì)胞
HEK293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞、B4G12細(xì)胞
EC-9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s細(xì)胞、BaF3細(xì)胞、G292細(xì)胞
PNT1-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL4細(xì)胞、GC-1細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞
Tu686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-RO 81細(xì)胞、SUM102細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞
TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
BERH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞
Super Tube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞、TE5細(xì)胞
AR4-IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3 HeLa細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞
HEK293T/17 Cell:人胚腎細(xì)胞系
W133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN 4細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞
RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEpiC細(xì)胞、HRA19細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞
L5178Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞、PL-5細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
NCI-H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞
MDAMB134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞
RSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細(xì)胞、TKB1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞
Scott and White No. 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H735細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞
HS-445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC.3細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞、H226細(xì)胞
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