"451Lu epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
U266B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
RPMI7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞
SCC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
細胞生長:貼壁
451Lu epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
TC-1[JHU-1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
MPC 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細胞、H1105細胞、SEG-1細胞
HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
451Lu epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認(rèn)為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞
HEK-293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞
PC12(高分化)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞
SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH2細胞、NPC-TW01細胞、NCIH1435細胞
NCIH208細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
451Lu epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
C-Lu65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞
HNE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
EU-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞
GM3570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
IHHA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
TALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
SBC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
NP-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞
MH-22a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞
18G3.cl 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
201T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞
SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
UACC893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
HSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
PLA-801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞
P3/X63/Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞
P3.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞
MLFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
LS-123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 739.T細胞、HEK293-F細胞、H2330細胞
A498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞
HCC 2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
H-510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
SUP T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
451Lu epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
HTh-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細胞、MCF7/WT細胞、COLO679細胞
Hs940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2228細胞、H-1688細胞、RN細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細胞、HT 115細胞、BC-020細胞
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