"451Lu 人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無(wú)菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿(mǎn)，折光性好，生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過(guò)換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來(lái)實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源 
451Lu 人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法5min還不能消化），這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分 
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細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱(chēng)之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類(lèi)盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒(méi)辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞 
OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞 
RPMI 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞、H-735細(xì)胞 
NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞 
HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞 
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞 
RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞 
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞 
SW-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞 
SH-SY5Y Parental細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-70細(xì)胞、YD38細(xì)胞、Calu6細(xì)胞 
U-138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞 
CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞 
GM01232E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞 
Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞 
NS-20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF CEM細(xì)胞、VK2細(xì)胞、U2932細(xì)胞 
Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞 
CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞 
Adeno 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞 
JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞 
RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞 
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NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞 
HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞 
PC-3M IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、AML-12細(xì)胞 
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞 
PANC 813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞 
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞 
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞 
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞 
Hs 695.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC6細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞 
C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞 
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞 
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞 
GP-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo7e細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞、LCMS細(xì)胞 
MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞 
Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞 
SUDHL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92-MI細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞 
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞 
ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞 
Mc Ardle 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-PRF-5細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞 
H-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2 ad細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞 
293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞 
CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞 
PAa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞、C-8161細(xì)胞 
BEL 7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H128細(xì)胞、D-341細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞 
SUM102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-920細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞 
MAD109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas422細(xì)胞、S16細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞 
253J-BV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞 
NCIH2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA-Dx5細(xì)胞、OE-21細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞 
KYSE510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞 
H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細(xì)胞、UMR106細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞 
CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞 
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞 
KNS42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4II細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞 
H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細(xì)胞、H596細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞 
PC.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞 
L-540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO 81-2細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞 
CPA47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞 
Bovine ENDometrial cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N9細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞 
SK.MEL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain KB細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、95-D細(xì)胞 
SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞 
NCI-H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 451-Lu細(xì)胞、TALL1細(xì)胞、H-226細(xì)胞 
451Lu 人黑色素瘤細(xì)胞系
LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞 
MDA-MB-231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞 
H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞 
BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞 
207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOS細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞 
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞 
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞 
Tu177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞、HPDE細(xì)胞 
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞 
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞 
JROECL 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BI-Mel細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞 
RPMI 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞、A 2058細(xì)胞 
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