"A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:NGF受體陽(yáng)性。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞 Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞 Calu 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細(xì)胞、SW780細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。 VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞 MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞 SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞 HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞 PC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:多角形 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! KE-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞 Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞 IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞 OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞 COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞 MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞 KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞 KM12-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B TK-細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、HLFa細(xì)胞 Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 205細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞 IM-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW948細(xì)胞、CPA47細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞 A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞 0V-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780S細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞、JB 6細(xì)胞 U2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞 GM01232細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞 RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞 COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞 COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞 BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞 NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞 MADB-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞 WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞 CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞 RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞 GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞 CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞 H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞 3T6-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細(xì)胞、STC-1細(xì)胞、G361細(xì)胞 BC-PAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞 HCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH522細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞、PLC細(xì)胞 LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞 C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞 C22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 420細(xì)胞、Ca759細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞 Scott and White No. 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H735細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞 University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞 NR 8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-30細(xì)胞、SF 539細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞 H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細(xì)胞、H2023細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞 A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-hTERT細(xì)胞、ME16C細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞 NU-GC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-1細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞 PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞 95-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 870 Emory University-4細(xì)胞、SHP77細(xì)胞、SCI1細(xì)胞 Panc3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG13細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞 HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞、SNK1細(xì)胞 NIH:OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly8細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞 NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞 Hs 895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞 CT 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞 SK-RC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞 H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞 DOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM12878細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞 HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞 IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞 Huh-7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞 ARO81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS2細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞 MFE 280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞 HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞 HTh74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1568細(xì)胞、KG1A細(xì)胞、KY-50細(xì)胞 WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞 BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞 RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞 MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞 3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞 A-875 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞 Z138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞 H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細(xì)胞、YAC細(xì)胞、A375細(xì)胞 IPLB-SF 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HITT15細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞 "
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