"WEHI-164 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞
DI TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞
MDCC MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA-144細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
WEHI-164 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌,不需再無(wú)菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞
Granta-519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞
P3X63 AG8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細(xì)胞、HMEC細(xì)胞、HELF細(xì)胞
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS-2B細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞
NRCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fu97細(xì)胞、8505C細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
WEHI-164 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
MUTZ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞
U87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC1005細(xì)胞、ECC10細(xì)胞、RCM1細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
HS578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-468細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
OCILY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細(xì)胞、SUM149細(xì)胞、CV-1細(xì)胞
KBM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM-1細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、NW38細(xì)胞
WEHI-164 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞
BC-009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞
MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
NS20-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞、FM-88細(xì)胞
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞
H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞
Mono Mac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoN細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞
L615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132C細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞
MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
NCI-H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH-a細(xì)胞、C8166-CD4細(xì)胞、H-196細(xì)胞
WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞
D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞
AAV-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P19細(xì)胞、A1847細(xì)胞、HECV細(xì)胞
NCIH358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO-1細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞、COS-1細(xì)胞
Hs281T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBdSMC細(xì)胞、T9細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞
SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞
EAhy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs.27細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞
3T3-F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞
Colon38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H125細(xì)胞、RC13細(xì)胞、JF305細(xì)胞
NCIADR.RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE 1細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞、3LL細(xì)胞
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞
Saos2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞
mIMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR4細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞、H1882細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
GM04154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細(xì)胞、PC9細(xì)胞、CEL細(xì)胞
X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞
SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、CAMA細(xì)胞
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞
HDLM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
CL-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-3細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞
H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro2a細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞
P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞
MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8402細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞、C 643細(xì)胞
GM03320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞
KE37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2107細(xì)胞、J111細(xì)胞、M14細(xì)胞
Panc05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCPEpiC細(xì)胞、SW.620細(xì)胞、AtT20細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
LOUNH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112 CoN細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞
IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞
Jiyoye(P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、ECC1細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
Line 697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 226細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞
UMRC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
WEHI-164 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
H-2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kelly細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞、Reh細(xì)胞
MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞
B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI6666細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、COS-7細(xì)胞
MUTZ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞
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