"WEHI-164 Adherent小鼠纖維肉瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
WEHI-164 Adherent小鼠纖維肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
KM12 SM細胞系相關產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
MKN 7細胞系相關產(chǎn)品:MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
HP615細胞系相關產(chǎn)品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MM6細胞系相關產(chǎn)品:Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞
IPLB-SF 21細胞系相關產(chǎn)品:HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
DHL6細胞系相關產(chǎn)品:KASUMI6細胞、C22細胞、LM(TK-)細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
WEHI-164 Adherent小鼠纖維肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈;2)不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。
RenCa細胞系相關產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
BHP 10-3細胞系相關產(chǎn)品:W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
CL40細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
H2023細胞系相關產(chǎn)品:SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
LCLC-103H細胞系相關產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
SW-954細胞系相關產(chǎn)品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
SaOS-2細胞系相關產(chǎn)品:A2058細胞、HO8910PM細胞、LNCaP-FGC細胞
130-T細胞系相關產(chǎn)品:G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
H-1563細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞
mREC細胞系相關產(chǎn)品:SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
R.K.13細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關產(chǎn)品:WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
PGLH7細胞系相關產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
WEHI-164 Adherent小鼠纖維肉瘤細胞系
UMNSAH-DF-1細胞系相關產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
SF 767細胞系相關產(chǎn)品:TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
CHL-1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞
X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
BA/F3細胞系相關產(chǎn)品:DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
H711細胞系相關產(chǎn)品:IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
VERO C 1008細胞系相關產(chǎn)品:IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
GM17346細胞系相關產(chǎn)品:A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
U266細胞系相關產(chǎn)品:MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
DK-MG細胞系相關產(chǎn)品:CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞
OCI-AML2細胞系相關產(chǎn)品:COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
GES-1細胞系相關產(chǎn)品:HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
Hs27F細胞系相關產(chǎn)品:LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
HuP-T4細胞系相關產(chǎn)品:LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
DMS-114細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
Caco-2/BBe細胞系相關產(chǎn)品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
CCD1095Sk細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞
UM-UC14細胞系相關產(chǎn)品:NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞
R2C細胞系相關產(chǎn)品:Y3-Ag1,2,3細胞、SW-620細胞、HOP-92細胞
MCA-38細胞系相關產(chǎn)品:MILE SVEN 1細胞、MOLT 3細胞、OCI Ly10細胞
IFRS1細胞系相關產(chǎn)品:SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
COV362細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
T-HSC細胞系相關產(chǎn)品:SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
PaTu-8988s細胞系相關產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
HEC1A細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
CG-4細胞系相關產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關產(chǎn)品:PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
BC3H-1細胞系相關產(chǎn)品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞
D6P2T細胞系相關產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
MOLT-3細胞系相關產(chǎn)品:HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
PC-14細胞系相關產(chǎn)品:SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞
Keio University-19-19細胞系相關產(chǎn)品:SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
HC11細胞系相關產(chǎn)品:MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
3T3-442A細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞
Epstein-Barr-2細胞系相關產(chǎn)品:HK2細胞、MLTC-1細胞、SKMES細胞
SU-DHL-10細胞系相關產(chǎn)品:BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞
CLL-CII細胞系相關產(chǎn)品:SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
SJSA-1細胞系相關產(chǎn)品:PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
CWR-22rv1細胞系相關產(chǎn)品:H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞
CMT-64細胞系相關產(chǎn)品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
H-1092細胞系相關產(chǎn)品:Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
HHL-5細胞系相關產(chǎn)品:PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞
WEHI-164 Adherent小鼠纖維肉瘤細胞系
P3X63 Ag8細胞系相關產(chǎn)品:H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
WBF344細胞系相關產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
SNB-19細胞系相關產(chǎn)品:LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞
L5178Y細胞系相關產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
BGC823細胞系相關產(chǎn)品:KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
SKMES-1細胞系相關產(chǎn)品:PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞
Ra #1細胞系相關產(chǎn)品:PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞
P3HR1-BL細胞系相關產(chǎn)品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
ABC1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
Capan-1細胞系相關產(chǎn)品:COLO-1細胞、EFM192B細胞、58F細胞
H1568細胞系相關產(chǎn)品:MSTO-211細胞、UPCI:SCC154細胞、LA-N-6(OAN)細胞
CL40細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293H細胞、Y 1細胞、EU-3細胞
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