"Hep-G2 epithelioid cells人肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞
細胞生長：貼壁
Hep-G2 epithelioid cells人肝癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
SK-MES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞
Colo-678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Hep-G2 epithelioid cells人肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
T173細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
MGECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
P3-X63-Ag 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1618細胞、NBLS細胞、TGW細胞
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
COLO 679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
Hep-G2 epithelioid cells人肝癌細胞系
PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
SSP-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
Hs819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞
PLC PRF 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
SK MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
L-5178-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
EJ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
SNU520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
BEL-7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
F98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
tdott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞
SLMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、SNU1細胞、BV173細胞
Hs 675.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞
NCIADR.RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞
SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
HEK-293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
Kit225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
UT7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞
WM266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
U 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
U14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
MHCC 97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
MFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞
HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
RAOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
SW 1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞
OCI-AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
Hep-G2 epithelioid cells人肝癌細胞系
H-1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞
HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2591細胞、SN-12C細胞、NCI-H1522細胞
Ramos G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-579細胞、WIL2 S細胞、JCA-1細胞
C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細胞、MRC5細胞、NCI-H125細胞
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