"EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。【分裝稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開(kāi)始貼附在瓶壁上。
JHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細(xì)胞、LP1細(xì)胞、IM95細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
NIH 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
RKO-AS-45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
WEHI 164 TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683T細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞
RFL 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 325細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞、SUM52細(xì)胞
FCCH1024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞
SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞
LAN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細(xì)胞、KMM1細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞
MDA-MB-175-VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、NB.4細(xì)胞
SNGM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞、293-FT細(xì)胞
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞
NCI-H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 180細(xì)胞、H22細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞
Colon-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞
T-HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞
EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞
A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞
A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
Ra #1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-10細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞、H-1781細(xì)胞
H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞
NCI-H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細(xì)胞、WM 239細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞
H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1882細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞
L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞
NCI-H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC Sup細(xì)胞、Hs695細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
Mono Mac 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細(xì)胞、KE 37細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞
BC-022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL-4細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞
Hs832T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA I細(xì)胞、SCL I細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
PC-9/S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細(xì)胞、H-498細(xì)胞、D407細(xì)胞
SW480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAEpiC細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞、TK-1細(xì)胞
HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞
NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEG-3細(xì)胞、SW 839細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞
HCE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細(xì)胞、SMA560細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞
SVG(P12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH1細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞
EA hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞
BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
J774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細(xì)胞、SKM1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞
NPC-TW039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞
HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞
HeLa 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細(xì)胞、LS 180細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞
U-2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞
Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞
ACC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細(xì)胞、GM637細(xì)胞、EFO27細(xì)胞
Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
MDA-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5細(xì)胞、KY180細(xì)胞、M4e細(xì)胞
MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞
EC-GI-10 Adherent人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
CAL 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC200細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞
NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞
SK-MEL-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細(xì)胞、Ly8細(xì)胞、NEC細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞
Karpas422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞
RBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc.SF細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞、H747細(xì)胞
NCI-SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、LL2細(xì)胞
MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞、GRSL細(xì)胞
FCCH1024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞、TOG細(xì)胞
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