"VA-ES-BJ Adherent人上皮樣肉瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
VA-ES-BJ Adherent人上皮樣肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
95-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
細胞傳代方法：１：３傳代，每周２次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞
ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞
751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
細胞生長特性：貼壁生長
VA-ES-BJ Adherent人上皮樣肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
OCI-Ly 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
CMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞
PK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
NIH 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
NMCG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
VA-ES-BJ Adherent人上皮樣肉瘤細胞系
SUDHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
SKRC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
HSKMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
KP4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
SF-539 BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS513細胞、293T/17細胞、HSC-4細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
NUGC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞
H-1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
aNK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
NCI-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
MBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞
UMNSAH/DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞
KP-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞
MuM-2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞
RMS13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
hSCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
F98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
CMT-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
CMT-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
KLN-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞
RBL-2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
COLO-320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
VA-ES-BJ Adherent人上皮樣肉瘤細胞系
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
QBI-HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
149 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞
NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞
C-4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
NP69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2023細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、SBC3細胞
NTera2 cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu8988s細胞、L02細胞、U-138MG細胞
NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細胞、NCI-SNU-878細胞、KYSE-520細胞
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