"Daoy Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Daoy Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
HSKMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166-CD4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、SIRC細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
GM-346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVHM細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞、NBLS細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx-147細(xì)胞、H510A細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞
BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞
KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HVSMC細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、QG-56細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
Daoy Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：多邊形
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞
B16-F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs737T細(xì)胞、AK細(xì)胞、HOEC細(xì)胞
SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞
EFM192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞
HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞
HEK-293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細(xì)胞、Reh細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞
DMS 153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
S91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞
HuH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細(xì)胞、DHL10細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞
Pro-Lec1.3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 clone A31細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞
Daoy Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞
MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEB細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞、MB157細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞
Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A/C1細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞、U-251細(xì)胞
hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
HEL-92_1_7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
KHYG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates 1B細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞、H2172細(xì)胞
A375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞
3T3NIH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞
G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞
RPMI no 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH82細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞、ARH77細(xì)胞
RWPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞
NCIH508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC893細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞
NCI-H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞、Colo16細(xì)胞
NTERA-2 clone D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H226細(xì)胞、H-226細(xì)胞、C81-61細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞
HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
Hs822T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL6細(xì)胞、HR-1細(xì)胞、HLE細(xì)胞
SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞
W256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞
CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞
BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 8細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞
NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
J 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK-13細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、REC細(xì)胞
OVCAR 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02.03細(xì)胞、GM01232細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞
U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞
DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞
NCI-H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞
Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞
Daoy Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞
MCCAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGHAVSMC細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞、H1437細(xì)胞
SK.MEL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain KB細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、95-D細(xì)胞
CAL-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 678細(xì)胞、WM451細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞
OCILY10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
PANC 813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞
SW 756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G422細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、SW-948細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
B16-F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs737T細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、H1155細(xì)胞
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