"D341 Med Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
D341 Med Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對(duì)于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞
H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞
GM03573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、GM03320細(xì)胞、H-2141細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H-647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞
hTERT-RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAS細(xì)胞、MASMC細(xì)胞、TE32細(xì)胞
H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：懸浮生長
D341 Med Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：髓母細(xì)胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。
NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞
KE 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-4細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞
Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞
Hs 683.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC1細(xì)胞、RPTC細(xì)胞、HS5細(xì)胞
MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞
K-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GFP-Olig2細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、H3255細(xì)胞
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞
NCI H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-606-T細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞、KGN細(xì)胞
IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞、H1048細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞
L-5178-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞
D341 Med Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
MDA-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞
EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞
EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞
COLO 320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞
MES23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
RAT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細(xì)胞、Walker256細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞
HTR8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
EST81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞
BC-028細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細(xì)胞、H446細(xì)胞、IAR20細(xì)胞
HCE-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-8_13細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
MC-CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞
CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞
Y3-Ag1,2,3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞
Line 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1806細(xì)胞、BC-022細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細(xì)胞、MDA415細(xì)胞、HPAC細(xì)胞
UMRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D/cl3細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞
HEL92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMEC細(xì)胞、MDA157細(xì)胞、GM05372細(xì)胞
HCC-1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞
NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
SMA-560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
MXI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earles's cells細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
RGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683.T細(xì)胞、L615細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞
H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞
H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞
NCI-H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞
C17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-453細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞
T173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞
SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞
D341 Med Adherent人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
HS-940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940-T細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞、HSF2細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞
Hs 445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OP9細(xì)胞、TK.10細(xì)胞、H-1963細(xì)胞
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
RT-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32-mel細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞、RCC10細(xì)胞
EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
B16 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞、H889細(xì)胞
HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞
Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞
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