"D283 Med Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
D283 Med Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我常看到一個比較復(fù)雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
H-1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞
細胞傳代方法:每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
HO8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞
細胞生長特性:懸浮細胞的多細胞聚集體,和一些貼壁細胞
D283 Med Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
細胞接收操作說明:請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用,懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多,當然,有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞,但是,長期經(jīng)驗來說,貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計是細胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生),個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會長得很慢,嚴重的,會導致細胞死亡等危險),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細胞后,直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
HTh-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞
MGH-U3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-K8細胞、AR4-2J細胞、PANC1005細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
HuLEC-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
JVM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
Japanese Tissue Culture-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞
GM05384細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
MCA 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞
D283 Med Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
Hep-G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
HFT8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
CAL 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
H-548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
TE3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞
KYSE30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞
Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
CTV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞
TO175T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞
KYSE 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
HEC-151細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
H-2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
NCIH1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
D283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
Capan2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
AM-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
hCMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
HLE-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞
KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
MHCC97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
BT 325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
U-373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
HTori-3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
Hs-606-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES1細胞、NCIH1838細胞、LP-1細胞
Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
D283 Med Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
S16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞
UMNSAH/DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞
NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
S3-HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
PC3-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細胞、SK-N-BE2C細胞、MUVEC細胞
OV 1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細胞、SK-MES1細胞、IR 983F細胞
MGH-U3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-K8細胞、GTL 16細胞、MIA PaCa-2細胞
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