"RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
細胞背景資料：腫瘤抑制基因： p５３ + [PubMed: ９２１４６０５] pRB + [PubMed: ９２１４６０５] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的１８(HPV-１８)進行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-１ (ATCC CRL-１１６０９) 細胞株 [PubMed: ９２１４６０５]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時，在雄激素作用下，RWPE-１細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: １１１７０１４２]. 當與Matrigel或基質(zhì)細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE-１細胞也能形成腺胞[PubMed: １１３０４７２４] 并產(chǎn)生PSA。 來源于RWPE-１的細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-２細胞株(ATCC CRL-１１６１０) [PubMed: ９２１４６０５] 和 RWPE２-W９９ (ATCC CRL-２８５３) 細胞株。 另外，用N--N-(MNU)處理RWPE-１，建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株。 它們是 WPE１-NA２２ (ATCC CRL-２８４９), WPE１-NB１４ (ATCC CRL-２８５０, WPE１-NB１１ (ATCC CRL-２８５１) 和 WPE１-NB２６ (ATCC CRL-２８５２) 細胞株。 據(jù)提供者報道，RWPE-１ 細胞株(ATCC CRL-１１６０９)經(jīng)過檢測，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
Walker-Ca.256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
H-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞
細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
細胞生長特性：貼壁生長
RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
HCC-1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
JM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞
SHG-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4細胞、A253細胞、SF295細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
TJ905細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞
KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
MDA-MB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞
VM Cub 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
Tj-905細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
TGBC-11-TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
mIMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-023細胞、CEM C7細胞、CNE-1細胞
Madison 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞
Madison 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
MC/CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
HS-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
TE354T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
CA-46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
MBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
MUGCHOR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
TOV21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PANC-1細胞、SNU398細胞
NCIH1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
NCIH2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
PGBE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
LY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
RWPE-1 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
F-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC細胞、WM266細胞、X63細胞
NCI H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
MN60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
CAL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細胞、KG-1a細胞、MPVECs細胞
3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細胞、2008細胞、H2286細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、3AA細胞、COR-L51細胞
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