1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 RWPE-1
細(xì)胞別稱 RWPE1
細(xì)胞背景描述 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細(xì)胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進(jìn)行轉(zhuǎn)化,建立了RWPE-1細(xì)胞株[PubMed:9214605]。在三維Matrigel培養(yǎng)時(shí),在雄激素作用下,RWPE-1細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA[PubMed:11170142]。當(dāng)與Matrigel或基質(zhì)細(xì)胞混合注射雄性裸鼠時(shí),RWPE-1細(xì)胞也能形成腺胞[PubMed:11304724]并產(chǎn)生PSA。來源于RWPE-1細(xì)胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2細(xì)胞株[PubMed:9214605]和RWPE2-W99細(xì)胞株。另外,用N-甲醇-N-硝基脲(MNU)處理RWPE-1細(xì)胞,建立了一系列模擬前列腺癌進(jìn)程中不同時(shí)期的成瘤細(xì)胞株。它們是WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26細(xì)胞株。據(jù)提供者報(bào)道,RWPE-1細(xì)胞經(jīng)過檢測,乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。
供體年齡 男;54歲
組織來源 器官:前列腺;疾?。赫?;細(xì)胞類型:上皮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生長特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級 2
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 K-SFM+0.05mg/mL BPE+5ng/mL EGF+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~22 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。