"RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液。2)向瓶內加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性，來使得細胞脫離基質附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
OCI-Ly 1細胞系相關產(chǎn)品：TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞
H1563細胞系相關產(chǎn)品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
MDA-MB435細胞系相關產(chǎn)品：BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
UCLA-RO 81細胞系相關產(chǎn)品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
RPMI no. 8226細胞系相關產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
WM-2664細胞系相關產(chǎn)品：Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞
細胞生長特性：貼壁生長
RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
MAVER1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
VM-CUB-1細胞系相關產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
COLO-829細胞系相關產(chǎn)品：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
Capan2細胞系相關產(chǎn)品：H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞
ChaGo-K-1細胞系相關產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞系相關產(chǎn)品：HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞
A101D細胞系相關產(chǎn)品：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞
AU-565細胞系相關產(chǎn)品：LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
Karpas299細胞系相關產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關產(chǎn)品：OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
U-343 MG細胞系相關產(chǎn)品：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞
BT-549細胞系相關產(chǎn)品：H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞
H-2444細胞系相關產(chǎn)品：CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
GM04680細胞系相關產(chǎn)品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
NCIH2066細胞系相關產(chǎn)品：CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
S180細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
OCUM-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞
OCI Ly10細胞系相關產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
G401細胞系相關產(chǎn)品：PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
253JB-V細胞系相關產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
WC00044細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
KMS26細胞系相關產(chǎn)品：Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
C-8161細胞系相關產(chǎn)品：PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞
HTR8細胞系相關產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
OCI-AML3細胞系相關產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
H1836細胞系相關產(chǎn)品：H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
OCI-AML5細胞系相關產(chǎn)品：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞
LA-N-6細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
AE 1201細胞系相關產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關產(chǎn)品：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
SNB-19細胞系相關產(chǎn)品：LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞
rHSC-99細胞系相關產(chǎn)品：624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
WM35細胞系相關產(chǎn)品：A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞
H-1563細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞
G422細胞系相關產(chǎn)品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
HONE-1細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
Swiss 3T3細胞系相關產(chǎn)品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
DCS細胞系相關產(chǎn)品：GM16136細胞、KMS-26細胞、DU_145細胞
MDCKII細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
GM3569細胞系相關產(chǎn)品：P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關產(chǎn)品：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
OUMS23細胞系相關產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
AMJ2-C8細胞系相關產(chǎn)品：ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞
NCI-SNU-216細胞系相關產(chǎn)品：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞
MRC 5細胞系相關產(chǎn)品：BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞
Pa17C細胞系相關產(chǎn)品：H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞
293A細胞系相關產(chǎn)品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
C 6細胞系相關產(chǎn)品：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
C32 mel細胞系相關產(chǎn)品：MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞
UCLA-RO 81細胞系相關產(chǎn)品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
PIGI細胞系相關產(chǎn)品：GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞
WM239A細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞
B16BL-6細胞系相關產(chǎn)品：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
RWPE-2 Adherent人正常前列腺上皮細胞系
Psi-2-DAP細胞系相關產(chǎn)品：EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞
BC-024細胞系相關產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
HMO6細胞系相關產(chǎn)品：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
Panc02.03細胞系相關產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
MCMEC細胞系相關產(chǎn)品：IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
NCIH889細胞系相關產(chǎn)品：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
SCC 25細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
P-36細胞系相關產(chǎn)品：HCT_116細胞、OVCA-432細胞、HCe-8693細胞
AG06814-M細胞系相關產(chǎn)品：J774 A.1細胞、MLO-Y4細胞、NCIH1299細胞
COLO-829細胞系相關產(chǎn)品：A-10細胞、H-1573細胞、SW-962細胞
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