"WM266-4 Adherent人黑素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
WM266-4 Adherent人黑素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
有關實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的，現(xiàn)在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
PGBE1細胞系相關產(chǎn)品：Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
BT細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
CHG-5細胞系相關產(chǎn)品：SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
ARO81-1細胞系相關產(chǎn)品：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞
NCIH2227細胞系相關產(chǎn)品：OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
H322T細胞系相關產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
細胞生長特性：貼壁生長
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
32Dc3細胞系相關產(chǎn)品：L-M(TK-)細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞、BE(2)M-17細胞
GM01232E細胞系相關產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
Hs611T細胞系相關產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
HEC-151細胞系相關產(chǎn)品：HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
RL95細胞系相關產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
NCIH2196細胞系相關產(chǎn)品：HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
H596細胞系相關產(chǎn)品：GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
HCC9204細胞系相關產(chǎn)品：BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
AtT 20細胞系相關產(chǎn)品：HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
OVCAR.8細胞系相關產(chǎn)品：H-446細胞、HCM細胞、IPLB-Sf21AE細胞
LAN1細胞系相關產(chǎn)品：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
MCMEC細胞系相關產(chǎn)品：IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
SW-756細胞系相關產(chǎn)品：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
WM266-4 Adherent人黑素瘤細胞系
HSC5細胞系相關產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
ZYM-SVEC01細胞系相關產(chǎn)品：EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
DoTc2細胞系相關產(chǎn)品：Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
DoTc2細胞系相關產(chǎn)品：Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
MA-782細胞系相關產(chǎn)品：NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
NCI-H2087細胞系相關產(chǎn)品：SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
K7M2 wt細胞系相關產(chǎn)品：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
OCIAML2細胞系相關產(chǎn)品：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
NRK52E細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
SUDHL-6細胞系相關產(chǎn)品：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
L-132細胞系相關產(chǎn)品：CAL851細胞、EVSA/T細胞、OCI/AML5細胞
SCH細胞系相關產(chǎn)品：SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞
P3-X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞
PA I細胞系相關產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細胞系相關產(chǎn)品：G-Olig2細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、Wistar Institute-38細胞
H4IIE細胞系相關產(chǎn)品：H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞
HEK-293H細胞系相關產(chǎn)品：SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
Mc Coy細胞系相關產(chǎn)品：FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
VMCUB1細胞系相關產(chǎn)品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
DHL-5細胞系相關產(chǎn)品：KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC0070細胞
SUDHL6細胞系相關產(chǎn)品：H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
A2780-CP細胞系相關產(chǎn)品：Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
RAOEC細胞系相關產(chǎn)品：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞
WPE-int細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關產(chǎn)品：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
NCI-H-295細胞系相關產(chǎn)品：KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞
MCF.10A細胞系相關產(chǎn)品：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
VMRC-RCZ細胞系相關產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
HEK293-H細胞系相關產(chǎn)品：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關產(chǎn)品：SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
UMRC2細胞系相關產(chǎn)品：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
SNU620細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞
N1S1細胞系相關產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
IOSE80細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞
REC 1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞
TE32細胞系相關產(chǎn)品：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
TE-85 clone 5細胞系相關產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
FC33細胞系相關產(chǎn)品：MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞
SKNSH細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞
N87細胞系相關產(chǎn)品：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
WM266-4 Adherent人黑素瘤細胞系
RCK8細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
H-28細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
ECGI10細胞系相關產(chǎn)品：CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
HIEC-6細胞系相關產(chǎn)品：GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
TE-5細胞系相關產(chǎn)品：Leydig細胞、KU1919細胞、T.T細胞
RAW 264.7細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關產(chǎn)品：PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
IFRS1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
BAEC細胞系相關產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
A375S2細胞系相關產(chǎn)品：H1341細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、SCC 25細胞
3AO細胞系相關產(chǎn)品：TH1細胞、MHCC-LM3細胞、NCI-H102細胞
Hs606細胞系相關產(chǎn)品：JHH7細胞、NCI-SNU-620細胞、Sf21細胞
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