"A-875 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：NGF受體陽性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-875 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
PA-TU-8988S細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
CAL120細胞系相關產(chǎn)品：IMR90細胞、OCILY-19細胞、RK-13細胞
LC-2 ad細胞系相關產(chǎn)品：C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
細胞傳代方法：１：３傳代；３-４天１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC-44細胞系相關產(chǎn)品：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關產(chǎn)品：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
MiaPaCa-2細胞系相關產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
細胞生長特性：貼壁生長
A-875 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：多角形
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或對數(shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
H510細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
GH3細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
138MG細胞系相關產(chǎn)品：TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
H-2591細胞系相關產(chǎn)品：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
TK 10細胞系相關產(chǎn)品：MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
CAL12T細胞系相關產(chǎn)品：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
Hs742T細胞系相關產(chǎn)品：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞
SNU-638細胞系相關產(chǎn)品：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞
SNU16細胞系相關產(chǎn)品：CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞
U-251細胞系相關產(chǎn)品：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
H2030細胞系相關產(chǎn)品：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
Mhh-Call 2細胞系相關產(chǎn)品：GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞
A-875 Adherent人黑色素瘤細胞系
Rat 2細胞系相關產(chǎn)品：AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞
NCIH1915細胞系相關產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
SUNE-1細胞系相關產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
SUNE-1細胞系相關產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
EoL-1細胞系相關產(chǎn)品：MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞
SK ES 01細胞系相關產(chǎn)品：MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
HCC 70細胞系相關產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
HepG2-luc細胞系相關產(chǎn)品：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
Tsup-1細胞系相關產(chǎn)品：CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
CCD-112 CoN細胞系相關產(chǎn)品：266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產(chǎn)品：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
H446細胞系相關產(chǎn)品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
EFM192C細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
SF-763細胞系相關產(chǎn)品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
COR-L51細胞系相關產(chǎn)品：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
WM-239細胞系相關產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
CemT4細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1937細胞、X63-Ag8細胞、GM2219C細胞
X63-Ag 8.6.5.3細胞系相關產(chǎn)品：MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞
D283-MED細胞系相關產(chǎn)品：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關產(chǎn)品：Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
OVCAR4細胞系相關產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
DHL-2細胞系相關產(chǎn)品：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
Kit 225 K6細胞系相關產(chǎn)品：H-1385細胞、251 MG細胞、VMM5細胞
CPA 47細胞系相關產(chǎn)品：HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
Evsa-T細胞系相關產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
D-283細胞系相關產(chǎn)品：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞
786-O RCC細胞系相關產(chǎn)品：SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
P3JHR1細胞系相關產(chǎn)品：CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
TR-146細胞系相關產(chǎn)品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
SK-MEL24細胞系相關產(chǎn)品：IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
RMG-1細胞系相關產(chǎn)品：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
NCI-H69細胞系相關產(chǎn)品：H735細胞、PL 45細胞、MHCC 97-H細胞
T-98G細胞系相關產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
SU86.86細胞系相關產(chǎn)品：NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
IHHA-1細胞系相關產(chǎn)品：G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞
ARO81細胞系相關產(chǎn)品：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
B16/F10細胞系相關產(chǎn)品：Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
SK HEP 01細胞系相關產(chǎn)品：HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
PMVEC細胞系相關產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
HEK293-H細胞系相關產(chǎn)品：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
SNU-182細胞系相關產(chǎn)品：B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞
A-875 Adherent人黑色素瘤細胞系
FDCP1細胞系相關產(chǎn)品：RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞
RS4:11細胞系相關產(chǎn)品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
KAT5細胞系相關產(chǎn)品：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
TE 85.T細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
beta TC6細胞系相關產(chǎn)品：RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
NB-19細胞系相關產(chǎn)品：HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
SKCO 1細胞系相關產(chǎn)品：TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞
REC細胞系相關產(chǎn)品：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞
SkChA1細胞系相關產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB134細胞、ML2細胞、SPC-A-1細胞
KU 812F細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8226S細胞、LS-174T細胞、H4-IIE-C3細胞
138MG細胞系相關產(chǎn)品：TYKnu細胞、NCI-H1184細胞、H-1299細胞
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