"U-CH1 epithelioid cells人脊索瘤細胞系
細胞背景資料：骶骨脊索瘤；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
HSC4細胞系相關產(chǎn)品：H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞
Hce8693細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
PCI-4.2細胞系相關產(chǎn)品：CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞
細胞生長：貼壁
U-CH1 epithelioid cells人脊索瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCIH1876細胞系相關產(chǎn)品：OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞
Madison 109細胞系相關產(chǎn)品：NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞
SU86.86細胞系相關產(chǎn)品：NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
HEK 293 c18細胞系相關產(chǎn)品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
EJ 138細胞系相關產(chǎn)品：IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
U-CH1 epithelioid cells人脊索瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
MEF細胞系相關產(chǎn)品：OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
NCIH1341細胞系相關產(chǎn)品：L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞
Hep-G2細胞系相關產(chǎn)品：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
KNS-42細胞系相關產(chǎn)品：P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞
D6P2T細胞系相關產(chǎn)品：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
RS(4;11)細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
NCI-H1963細胞系相關產(chǎn)品：IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
MDA231-LM2細胞系相關產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
CL1-5細胞系相關產(chǎn)品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
MG-63細胞系相關產(chǎn)品：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
U-CH1 epithelioid cells人脊索瘤細胞系
H-2198細胞系相關產(chǎn)品：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
H-146細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
Kato-III細胞系相關產(chǎn)品：Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
Douglas Foster-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
OCI AML2細胞系相關產(chǎn)品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
HS-766T細胞系相關產(chǎn)品：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
HS-766T細胞系相關產(chǎn)品：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關產(chǎn)品：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
SF-539細胞系相關產(chǎn)品：SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞
H-2135細胞系相關產(chǎn)品：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
HCC1954BL細胞系相關產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
WM 2664細胞系相關產(chǎn)品：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
P-388細胞系相關產(chǎn)品：ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞
JCA1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
SKCO 1細胞系相關產(chǎn)品：TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞
HCC1569細胞系相關產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
NCI-H1522細胞系相關產(chǎn)品：H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞
H-1048細胞系相關產(chǎn)品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
AML-EOL-1細胞系相關產(chǎn)品：HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
Swiss 3T3細胞系相關產(chǎn)品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
MB 157細胞系相關產(chǎn)品：UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
GM06141細胞系相關產(chǎn)品：RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞
F36P細胞系相關產(chǎn)品：MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞
P3JHR-1細胞系相關產(chǎn)品：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
NG 108-15細胞系相關產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
PNT-1A細胞系相關產(chǎn)品：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
SuDHL 5細胞系相關產(chǎn)品：Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞
624 MEL細胞系相關產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
L-02細胞系相關產(chǎn)品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
Bx-PC3細胞系相關產(chǎn)品：Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
NCM356細胞系相關產(chǎn)品：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
H-1651細胞系相關產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
SuDHL 1細胞系相關產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
OV-2008細胞系相關產(chǎn)品：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞
NCI-H211細胞系相關產(chǎn)品：H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
CCD-841-CoN細胞系相關產(chǎn)品：DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
COLO824細胞系相關產(chǎn)品：U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
HCT FET細胞系相關產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
OVCAR.8細胞系相關產(chǎn)品：H-446細胞、HCM細胞、IPLB-Sf21AE細胞
NCI-SNU-119細胞系相關產(chǎn)品：NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
SKO3細胞系相關產(chǎn)品：143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
BCPAP細胞系相關產(chǎn)品：NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
MDAMB415細胞系相關產(chǎn)品：293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
G401細胞系相關產(chǎn)品：PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
AE 1201細胞系相關產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
D-341Med細胞系相關產(chǎn)品：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
SJ-RH30細胞系相關產(chǎn)品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
U-CH1 epithelioid cells人脊索瘤細胞系
IMCD3細胞系相關產(chǎn)品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
MZCRC1細胞系相關產(chǎn)品：PNT-1A細胞、PANC 1005細胞、U-251MG細胞
PANC0203細胞系相關產(chǎn)品：SK-BR3細胞、Raji細胞、CD 18細胞
HepG2細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-148細胞、P388細胞、MSB-1細胞
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