"HC11 epithelioid cells細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱唵?,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個事情,因?yàn)檫@個東西流程長。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話,這個細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 DC2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2-DAP細(xì)胞、PK136細(xì)胞、HNSC細(xì)胞 Ca759細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞 UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 HC11 epithelioid cells細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 COV-434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞 SK MEL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 420細(xì)胞、AKR細(xì)胞、Case 3細(xì)胞 EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞 JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞 Kuramochi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-4細(xì)胞、OP9細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HC11 epithelioid cells細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。 786-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞 RBMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2 4510細(xì)胞、G401細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞 HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞 NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞 HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞 NCTC 3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞、JAR細(xì)胞 P3X63 AG8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細(xì)胞、HMEC細(xì)胞、HELF細(xì)胞 HeLaS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞、AC29細(xì)胞 Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞 Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細(xì)胞、OE-33細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞 HC11 epithelioid cells細(xì)胞系 SUDHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞 H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞 BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞 RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞 Panc 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞 VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞 VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞 J82 COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細(xì)胞、Namalva細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞 FaDu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞 PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞 QSG-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞 CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞 ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞 CTLL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞 LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞 AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞 HPAF/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUS-M1細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞 C17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-453細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞 A 2780 CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-620細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞 MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞 MDA361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞 mIMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-023細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞 SACC-LM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC6細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞 SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞 Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞、SW1463細(xì)胞 OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞 OB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lieming Xu-2細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞、A2780細(xì)胞 NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞 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KPL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1417細(xì)胞、SW626細(xì)胞、BMDC細(xì)胞 HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞 BT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細(xì)胞、H-1694細(xì)胞、MC-4細(xì)胞 HASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞 LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-520細(xì)胞、ISHI細(xì)胞、GM12878細(xì)胞 Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞 TK.10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/DDP細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞、TOV112細(xì)胞 C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞 Caki2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2C細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞 HBL 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOE6細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞 HC11 epithelioid cells細(xì)胞系 MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞 RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、C-32細(xì)胞 U2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細(xì)胞、P19細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞 HCC-1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B/C3T3細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞 "
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