"IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腎；自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
Cates 1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP2細(xì)胞、67NR細(xì)胞、A549細(xì)胞
EMT-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL2細(xì)胞、MCM細(xì)胞、GA-10細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
CCRF SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞、A101D細(xì)胞
HTh74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1568細(xì)胞、KG1A細(xì)胞、KY-50細(xì)胞
UACC-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144-mel細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞、H69C細(xì)胞
H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞
H-2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞
COLO320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 7860細(xì)胞、A431/P細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞
SKNF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAC-84細(xì)胞、SNU638細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
SUM52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞
IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細(xì)胞系
Lu-99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞
SUM 149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞
H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-ATCC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞、RC-2細(xì)胞
SW 1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2/D1細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞
SC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1105細(xì)胞、3AO細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞
NCIH1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
MGH-U1 (EJ)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞、H1436細(xì)胞
A2780 CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞
COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞
H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞
HARAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA. hy 926細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞
SGC-7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細(xì)胞、NK-92細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞
KP-N-RT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1563細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞、HG2855細(xì)胞
Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞
MAVER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞
OC 316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539 BT細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞
B16/F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/ag細(xì)胞、SW-839細(xì)胞、ATN1細(xì)胞
MBT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞、EC109細(xì)胞
NCI H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細(xì)胞、SNU668細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞
RPMI2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞
JROECL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞
OCI-Ly 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 18細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUASMC細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞、Daudi細(xì)胞
AGS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma 261細(xì)胞、B 95.8細(xì)胞、H-596細(xì)胞
MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞
UO31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL-2細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
SW 982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
KYSE 510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞
Huh 7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM(TK-)細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞、UM2細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
HUT-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞
P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102PT細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞、RT112細(xì)胞
NCI-H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
ID8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPI-2I細(xì)胞、RA 1細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞
MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞
Hs888 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-4C細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞
OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞
IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細(xì)胞系
U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞
ECV304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、GB-1細(xì)胞
UACC-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144-mel細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞
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