"IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細胞系
細胞背景資料：腎；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
QGY 7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
細胞生長：貼壁
IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NeHepLxHT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
Cates 1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP2細胞、67NR細胞、A549細胞
EMT-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
HTh74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞
UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
SKNF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAC-84細胞、SNU638細胞、AtT-20細胞
HEK 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
SUM52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細胞系
Lu-99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
SUM 149細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞
H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
SW 1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2/D1細胞、Hs888T細胞、ECV 304細胞
SC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞
NCIH1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞
SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
Ishikawa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
MGH-U1 (EJ)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞
A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
SGC-7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞
KP-N-RT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
OC 316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞
B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
NCI H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
C-Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
WERI-Rb 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞
AGS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
MDA231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
UO31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
TE-671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞
KYSE 510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
Huh 7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
HUT-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
NCI-H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
Hs888 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
IB-RS-2 epithelioid cells豬腎細胞系
U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細胞、MCF-7/AdrR細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞
16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細胞、Pan02細胞、GB-1細胞
UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144-mel細胞、SKMEL28細胞、ELD-1細胞
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