"SACC-LM epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:涎腺腺樣囊性癌 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對水的通透性,且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會,從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。 Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞 MonoMac6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS53細(xì)胞、SUM190細(xì)胞、NCI-H810細(xì)胞 HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 SACC-LM epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 FHCRC subclone 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞 OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞 SU86_86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-I細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞 EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞 H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SACC-LM epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞 KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞 MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞 NCI-H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞 PLA801-95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞 L 540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT1細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞 PAN 02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞 WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞 KNS81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-J2細(xì)胞、LS-513細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞 HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞 SACC-LM epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系 MDA-MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞、SF-126細(xì)胞 KPL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1417細(xì)胞、SW626細(xì)胞、BMDC細(xì)胞 CAL120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR90細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞、RK-13細(xì)胞 B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞 Alexander細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、95D細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞 OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞 OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞 HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞 AX-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK-1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞 Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞、RCC4細(xì)胞 P30/Ohkubo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞 JOSK-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO-1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、HcaF細(xì)胞 NTERA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-4細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞 NOR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-387細(xì)胞、SL-29細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞 BE(2)M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞 HEK293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞、U87MG細(xì)胞 Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞 Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞 UCLA-SO-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H650細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞、H-711細(xì)胞 HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞 IPEC-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞 786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞 H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞 H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細(xì)胞、COLO679細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞 CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞 Panc3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG13細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞 SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞 HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞 H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞 NCIH250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH322細(xì)胞、8305-C細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞 OCI-LY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-18Co細(xì)胞、A-427細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞 COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞 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SW.620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-215細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞 MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞 BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞 SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞 Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞 293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞 SKGT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞 SACC-LM epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系 OCI-AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-6.1細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞 KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3.1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞 Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、HPMC細(xì)胞 MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞、COLO679細(xì)胞 "
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