"SACC-83 epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細胞系 細胞背景資料:涎腺腺樣囊性癌 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞 Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞 G-292, clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞 細胞生長:貼壁 SACC-83 epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 P3HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞 BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞 NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞 WSU-DLCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞 253J-Bladder-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SACC-83 epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞 PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞 COLO 679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞 NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞 NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞 ARO 81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞 HS688AT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞 P3-X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞 KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞 YD15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞 SACC-83 epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細胞系 PL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞 NCIH1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞 COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞 TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞 SuDHL 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞 BaF3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞 BaF3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞 MUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞 HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞 OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞 CTLL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞 KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞 Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細胞、H810細胞、U251n細胞 G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞 NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞 HCC9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞 D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞 ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞 EC109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞 HEY A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞 OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞 MDA-MB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞 NCM460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞 SW527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞 Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞 HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞 BNL.CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞 NCI-H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞 HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞 Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞 HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞 D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞 293AD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞 MDCK (NBL-2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞 K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞 HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞 LLCMK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞 SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞 NHDF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞 Kupffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞 T 84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞 OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞 Hep G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞 Hep II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞 D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞 LN299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞 NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞 Hos TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞 AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞 NCI H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞 Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞 SACC-83 epithelioid cells涎腺腺樣囊性癌細胞系 MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞 V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細胞、BNL.CL2細胞、MMAc.SF細胞 OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、SNT-8細胞 COLO 679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV4細胞、UMUC-14細胞、WM-2664細胞 "
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