"M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
KG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞
MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細(xì)胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2008細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞
CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞
NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞
OsA-CL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE11細(xì)胞、TE6細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞
SHZ-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF382細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
B16/F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/ag細(xì)胞、SW-839細(xì)胞、ATN1細(xì)胞
CCC-HPF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rHSC-99細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
PNT1-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL4細(xì)胞、GC-1細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
MRCV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H524細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞、D-283細(xì)胞
SJRH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、746T細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細(xì)胞系
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞
EA hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
HB611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞
U87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC1005細(xì)胞、ECC10細(xì)胞、RCM1細(xì)胞
WC00059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞
WC00059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞
87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888 Lu細(xì)胞、KU.812細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞
NH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞
Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞
SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞
Bowes melanoma cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1187細(xì)胞、Panc327細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞
451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞
SUP T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-325細(xì)胞、MT-2細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
OV433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMO6細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞、RSC96細(xì)胞
Hs 578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1171細(xì)胞、Tu686細(xì)胞、J82細(xì)胞
DMS-273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840_T細(xì)胞、2780細(xì)胞、201T細(xì)胞
SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞
OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR.OV1細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞
Liver-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-4細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞
OVCAR 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02.03細(xì)胞、GM01232細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞
U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞
HNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞
95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
SUSM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 527細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞、Eca109細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
CNE-2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞
NCI-H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92細(xì)胞、H676細(xì)胞、VSMC細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞
H-838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP-1細(xì)胞、ACC3細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞
MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
H-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH91細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞、KLM1細(xì)胞
GH 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLCL9B10細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞
LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細(xì)胞系
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
MADB106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEG3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞
CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
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