"M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
Pan02細胞系相關產品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
KG-1細胞系相關產品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
MLOY4細胞系相關產品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
細胞生長：貼壁
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據細胞株數據單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據細胞種類和濃度，于無菌操作臺內取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關產品：2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
CHO K1細胞系相關產品：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
NCIH522細胞系相關產品：Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
OsA-CL細胞系相關產品：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
SHZ-88細胞系相關產品：PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
B16/F0細胞系相關產品：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
CCC-HPF-1細胞系相關產品：rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
GM02219D細胞系相關產品：RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞
PNT1-a細胞系相關產品：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
ROS 17/28細胞系相關產品：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
MRCV細胞系相關產品：NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞
SJRH-30細胞系相關產品：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
MALME.3M細胞系相關產品：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
SKLMS-1細胞系相關產品：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
OAC-P4C細胞系相關產品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細胞系
AA-Mel細胞系相關產品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
EA hy 926細胞系相關產品：GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
MCAEC細胞系相關產品：GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
HB611細胞系相關產品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
U87細胞系相關產品：PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞
WC00059細胞系相關產品：GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
WC00059細胞系相關產品：GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
87 MG細胞系相關產品：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞
NALM6細胞系相關產品：Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞
RIN14B細胞系相關產品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
P30OHK細胞系相關產品：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
NH-6細胞系相關產品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
Verda reno細胞系相關產品：Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
SNU-407細胞系相關產品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關產品：HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
451Lu細胞系相關產品：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
SUP T1細胞系相關產品：BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
HSC-4細胞系相關產品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
B16BL6細胞系相關產品：HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
EVSA/T細胞系相關產品：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
OV433細胞系相關產品：HMO6細胞、SH-SY5Y細胞、RSC96細胞
Hs 578Bst細胞系相關產品：HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞
DMS-273細胞系相關產品：Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
SCL-II細胞系相關產品：C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
OCI/AML-4細胞系相關產品：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
Liver-02細胞系相關產品：MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
OVCAR 420細胞系相關產品：Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
U-87MG ATCC細胞系相關產品：BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞
HNE-1細胞系相關產品：SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞
95D細胞系相關產品：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
MDA-435細胞系相關產品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
SUSM1細胞系相關產品：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞
NCI-H2286細胞系相關產品：SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
CNE-2Z細胞系相關產品：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
NPC-TW 01細胞系相關產品：SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
ZR75-1細胞系相關產品：MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
16-HBEo細胞系相關產品：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
HPMEC細胞系相關產品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
HPMEC細胞系相關產品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
NCIH661細胞系相關產品：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
4T1-LUC細胞系相關產品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
NCI-H23細胞系相關產品：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
MMAc.SF細胞系相關產品：PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
Det 562細胞系相關產品：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
H-838細胞系相關產品：CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
MDA-468細胞系相關產品：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
AMC-HN8細胞系相關產品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
H-322細胞系相關產品：LOU-NH91細胞、NCI-H125細胞、KLM1細胞
GH 3細胞系相關產品：HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞
LTEPsm細胞系相關產品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
SK MEL 28細胞系相關產品：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮膚細胞系
HEK 293-EBNA細胞系相關產品：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
MADB106細胞系相關產品：JEG3細胞、MFE280細胞、J774A.1細胞
CEM C7細胞系相關產品：NPC-TW 039細胞、MDCKII-WT細胞、COLO-679細胞
GM02219C細胞系相關產品：MCF 10A細胞、Line 207細胞、LCLC103H細胞
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