"MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞背景資料:MDA-MB-231來自患有轉移乳腺腺癌的51歲女病人的胸水。在裸鼠和ALS處理的BALB/c小鼠中,它能形成低分化腺癌(III級)。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 H-2227細胞系相關產(chǎn)品:HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞 TK10細胞系相關產(chǎn)品:KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞 Huh-7細胞系相關產(chǎn)品:MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞 細胞生長:貼壁 MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內,水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2傳代 KNS42細胞系相關產(chǎn)品:MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞 SW-954細胞系相關產(chǎn)品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞 Hs604T細胞系相關產(chǎn)品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞 LUDLU 1細胞系相關產(chǎn)品:HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞 U373-MG細胞系相關產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 HCC-1954BL細胞系相關產(chǎn)品:Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞 Hs821T細胞系相關產(chǎn)品:ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞 NCTC 929細胞系相關產(chǎn)品:Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞 NCI-H1522細胞系相關產(chǎn)品:H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞 PIEC細胞系相關產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞 T-ALL 1細胞系相關產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞 NR 8383細胞系相關產(chǎn)品:RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞 RCSMC細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞 HMrSV5細胞系相關產(chǎn)品:CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞 OCI-LY-3細胞系相關產(chǎn)品:MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞 MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌細胞系 A-704細胞系相關產(chǎn)品:CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞 SKG3A細胞系相關產(chǎn)品:IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞 NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品:H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞 H1404細胞系相關產(chǎn)品:He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞 COLO 680N細胞系相關產(chǎn)品:SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞 Ej138細胞系相關產(chǎn)品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞 Ej138細胞系相關產(chǎn)品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞 NCI-SNU-601細胞系相關產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞 SACC-83細胞系相關產(chǎn)品:LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞 CAL-120細胞系相關產(chǎn)品:Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞 MDA134細胞系相關產(chǎn)品:RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞 Rat-2細胞系相關產(chǎn)品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞 Hs675T細胞系相關產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞 RA 1細胞系相關產(chǎn)品:NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞 HCC-202細胞系相關產(chǎn)品:RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞 OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞 COLO394細胞系相關產(chǎn)品:373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞 CAMA細胞系相關產(chǎn)品:CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞 HepG2/C3A細胞系相關產(chǎn)品:SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞 LU65細胞系相關產(chǎn)品:130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞 U251細胞系相關產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞 OVCA 433細胞系相關產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞 KMST-6細胞系相關產(chǎn)品:DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞 EAhy926細胞系相關產(chǎn)品:Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞 MH7A細胞系相關產(chǎn)品:HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞 NOR-10細胞系相關產(chǎn)品:ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞 MILE SVEN 1細胞系相關產(chǎn)品:AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞 H1435細胞系相關產(chǎn)品:Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞 F9細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞 Roswell Park Memorial Institute 8402細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞 HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產(chǎn)品:N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞 BAEC細胞系相關產(chǎn)品:C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞 MLE 12細胞系相關產(chǎn)品:MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞 OCI AML3細胞系相關產(chǎn)品:SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞 NCI-H1092細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞 143BTK-細胞系相關產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞 HPDE6c7細胞系相關產(chǎn)品:B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞 CFPAC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞 MyLa 2059細胞系相關產(chǎn)品:B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞 PC-3M-2B4細胞系相關產(chǎn)品:GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞 HS766T細胞系相關產(chǎn)品:CTLL(2)細胞、HMO6細胞、PZ-HPV-7細胞 SO-RB50細胞系相關產(chǎn)品:U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞 Panc-05.04細胞系相關產(chǎn)品:SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞 RGC-6細胞系相關產(chǎn)品:RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞 Liver-02細胞系相關產(chǎn)品:MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞 KP-N-RT細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞 Hs819T細胞系相關產(chǎn)品:HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞 RPMI 1788細胞系相關產(chǎn)品:Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞 JVM-3細胞系相關產(chǎn)品:KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞 T-ALL-1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞 ECV細胞系相關產(chǎn)品:S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞 MDA-MB-231-luc epithelioid cells人乳腺癌細胞系 NW-38細胞系相關產(chǎn)品:Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞 LIM-1215細胞系相關產(chǎn)品:PANC0327細胞、H548細胞、OV433細胞 CAKI.1細胞系相關產(chǎn)品:SK-ChA1細胞、RCSMC細胞、DV-90細胞 NCTC 929細胞系相關產(chǎn)品:Panc02.03細胞、AM細胞、HTR8/SVneo細胞 "
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