"MDA-MB-231 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:MDA-MB-231來自患有轉(zhuǎn)移乳腺腺癌的51歲女病人的胸水。在裸鼠和ALS處理的BALB/c小鼠中,它能形成低分化腺癌(III級)。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞 NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞 Caki2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2C細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 MDA-MB-231 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿 MC-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞 SUM52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞 EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞 HBZY 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-MNNG細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞、REC1細(xì)胞 PLA-802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-025細(xì)胞、H1930細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MDA-MB-231 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞 HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞 COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞 HEL-92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35 Reuber細(xì)胞、SW620細(xì)胞、H-1836細(xì)胞 KPL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1417細(xì)胞、SW626細(xì)胞、BMDC細(xì)胞 786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞 NCI-H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞 BI-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG-1細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞、SW.620細(xì)胞 H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES-1細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞 PFSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞 MDA-MB-231 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 VMCUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞 H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細(xì)胞、H1781細(xì)胞、GM3569細(xì)胞 OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞 McCoy B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU16細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞 P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞 DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞 DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞 DMS-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U031細(xì)胞、AM38細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞 686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞 SuDHL 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH 82細(xì)胞、Ly7細(xì)胞、H378細(xì)胞 HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞 Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞 SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞 CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-72細(xì)胞、MFM223細(xì)胞、U-343細(xì)胞 HBL-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-I/1細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞、Hs27細(xì)胞 Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞 RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞 OCM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞 H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞 APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞 UT7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細(xì)胞、TE-671細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞 AML12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3-E1細(xì)胞、PIG3細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞 K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞 SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞 HT 1197.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBSMC細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞 SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞 JB6Cl30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLO-Y4細(xì)胞、H661細(xì)胞、DHL4細(xì)胞 WM115mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc203細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞 H-1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞 LU451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82 COT細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞 NCI/ADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:118 MG細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞、ACCM細(xì)胞 SAOS 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EO771細(xì)胞、SU.86細(xì)胞、Toledo細(xì)胞 FC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac1細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、AM38細(xì)胞 HeLa-S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞、SW 579細(xì)胞 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NCIH1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW2細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞 L6565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637F細(xì)胞、MB157細(xì)胞、DU145細(xì)胞 ABE8.1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞 OS-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC2細(xì)胞、SF-767細(xì)胞、3T6細(xì)胞 MDA-MB-231 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系 FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞 MIO-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細(xì)胞、H-548細(xì)胞、Rat1細(xì)胞 Hs-578-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2196細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞 COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞 "
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