"C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細胞系
細胞背景資料：該永生化細胞系源自出生８天小鼠小腦組織，由B Pessac, D Trisler建立。該細胞具有小神經(jīng)膠質(zhì)細胞特征。該細胞為GFAP陽性細胞，除此之外，沒有檢測到其它神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)元或小神經(jīng)膠質(zhì)細胞的分子標記。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
細胞生長：貼壁
C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２傳代
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
SW 839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
GM-3573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞
HEK 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
RAOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞
373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
RC92A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1648細胞、CCC-HEH-2細胞、HUT 125細胞
KLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
NCI-H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細胞系
PAI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
NP69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
COLO 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞
CT26WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞
MTEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1833細胞、Vero 76 clone E6細胞、HS-294細胞
DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞
PANC0203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞
MO59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
SK-RC 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
L5178-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞
K7M2 wt細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
PC 61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞
VA-ES-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
Mv 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
End1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
PLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞
SKNBE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
HT-29/CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
SN4741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
LNCaP clone FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞
H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-2664細胞、HcaF細胞、GM01232細胞
WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
ZR7530細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞
MeSoTheliOma-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞
Panc-327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
ECC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
LOUNH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
MUTZ3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
LN 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞
SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞
C8-D1A epithelioid cells鼠小腦細胞系
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
TFK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細胞、Kasumi 1細胞、HSC細胞
SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細胞、OCILY3細胞、MODE-K細胞
RAOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細胞、RMS 13細胞、LN229細胞
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