"BIU-87 epithelioid cells人膀胱癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞 OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞 3 LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞 細胞生長:貼壁 BIU-87 epithelioid cells人膀胱癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2傳代 DSL-6A-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細胞、SW-1271細胞、HMEC細胞 UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞 H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞 Caki-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞 EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 BIU-87 epithelioid cells人膀胱癌細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! HBZY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞 IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞 Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞 TB1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞 P 815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞 aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞 CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞 L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞 PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞 A-427細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞 BIU-87 epithelioid cells人膀胱癌細胞系 Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞 H-209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞 CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞 HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞 UMUC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞 NU-GC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞 WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞 OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞 FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞 ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞 OVCA432_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞 PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞 LTEP-s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞 CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞 SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞 HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞 AtT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞 PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞 Hs832.Tc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞 H-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞 NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞 TOV-21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞 LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞 H-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞 HCEC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞 MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞 SV-HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞 MDST8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞 OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞 CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞 COLO 741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞 T-ALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞 MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞 RBL2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞 LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞 L cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞 L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞 HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞 HCC-9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞 PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞 ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞 FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞 UCLA-SO-M20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞 Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞 MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞 L428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞 Karpas-422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞 Turbot Embryonic Cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞 HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞 NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞 NCI-H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞 BIU-87 epithelioid cells人膀胱癌細胞系 FUOV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞 HCC1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARIP細胞、hTERT-HME1細胞、HepaRG細胞 184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、PC615.3細胞 Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細胞、U251-MG細胞、HS940細胞 "
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