"B95-8 epithelioid cells絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 CC-LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞 IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞 LC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞 細胞生長:貼壁 B95-8 epithelioid cells絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2傳代 H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞 WB F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞 NB1-RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞 OCI/AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞 MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 B95-8 epithelioid cells絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞 SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞 OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞 CFSC-2G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞 JKT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞 MDAMB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞 HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞 BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞 OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞 HEK-293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞 B95-8 epithelioid cells絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞系 DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞 UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞 NCI-H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞 P30/0HK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞 OUMS-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞 MTC-TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞 MTC-TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞 L-M(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞 WERIRb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 15 HL-60細胞、HCC0070細胞、Ly18細胞 HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞 HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞 UCLA-SO-M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞 SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞 HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞 ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞 IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞 COLO 741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞 H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞 HSC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞 Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞 LS411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞 HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞 EST50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞 Y3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞 MC/CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞 HEY A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞 TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞 VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞 UMUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞 TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞 MARC 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞 MODE-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞 HT-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞 COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞 H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞 HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞 BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞 LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞 NR8383.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞 HPDLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞 UMNSAH/DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞 HCV-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞 TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞 EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞 SK-RC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞 H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞 KP-N-RT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞 OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞 OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞 MDA-MB-435 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞 B95-8 epithelioid cells絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞系 Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞 D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細胞、ROS-17/2.8細胞、LC-1/sq細胞 IPEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2C細胞、TMD8細胞、RASMC細胞 OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細胞、143TK-細胞、HLEpiC細胞 "
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