"EJ epithelioid cells人膀胱癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞 HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞 HCET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞 細胞生長:貼壁 EJ epithelioid cells人膀胱癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2傳代 746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞 C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞 DITNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞 H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞 NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 EJ epithelioid cells人膀胱癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞 OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞 BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞 KU 812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞 3T3-442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞 Hs 832(C).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞 LN 382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞 Panc2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞 B16 subline B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-2細胞、DMS-273細胞、CALU1細胞 BEL 7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞 EJ epithelioid cells人膀胱癌細胞系 SCL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞 CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞 Roswell Park Memorial Institute 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM3細胞、SGC7901/DDP細胞、C3H10T1/2細胞 Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞 Astrocyte type I clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞 MAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞 MAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞 H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞 GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞 H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞 CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞 NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A3細胞、Strain V細胞、B16細胞 X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞 SUM102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞 HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞 U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞 Neuro 2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞 Hs822T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL6細胞、HR-1細胞、HLE細胞 ROS 17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞 ROS 17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞 VeroE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞 CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞 Lewis-Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞 HPDEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞 NTHY-ORI3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞 SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞 HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞 MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞 CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞 RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞 NCIH810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞 H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞 GM03671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞 RL952細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞 E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞 MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞 Douglas Foster-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞 WEHI 164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞 A 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞 DI TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞 SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞 PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞 CCD-841-CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞 MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞 U343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞 FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞 Panc813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞 H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞 EBC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞 A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞 R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞 EJ epithelioid cells人膀胱癌細胞系 KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞 MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細胞、Hs822T細胞、H-1688細胞 TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3B細胞、huH 1細胞、MSC細胞 BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP 1細胞、ROS17/28細胞、MES-23.5細胞 "
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