Annexin V-APC/PI雙染雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
中文名稱:Annexin V-APC/PI雙染雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱:Annexin V-APC/PI Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20T|100T|50T
在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素APC 標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但對凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI 能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V- APC 與PI 匹配使用,就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開來。 本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(不推薦用于檢測組織樣本)。 注意事項(xiàng) 1. 微量試劑取用前請離心集液。 2. Annexin V-APC/PI 避光保存及使用。 3. PI 為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿防護(hù)服、戴手套等。 4. 本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不推薦用于檢測組織樣本。 5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽性,而用細(xì)胞刮子會造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測??蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進(jìn)一步的損傷。 6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請不要固定樣品。 7. 因檢測細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
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