Annexin V-APC/7-AAD雙染細胞凋亡檢測試劑盒
中文名稱:Annexin V-APC/7-AAD雙染細胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱:Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:10T|20T|50T|100T
在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。將Annexin V 進行熒光素APC 標記,以標記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發(fā)生。 7-AAD(7-amino-actinomycin D)是一種核酸染料,它不能通過正常質(zhì)膜,隨著細胞凋亡、細胞死亡過程,質(zhì)膜對7-AAD 的通透性逐漸增加,結(jié)合細胞凋亡中DNA 的有控降解,在合適波長激發(fā)光的激發(fā)下可發(fā)出明亮的紅色熒光,通過7-AAD 標記DNA 的強弱,將細胞分為三群:7-AAD 強為死亡細胞,7-AAD 弱是凋亡細胞,7-AAD-為正?;盍毎?。7-AAD 同PI 有著相似的熒光特性,但其發(fā)射波譜較PI 窄,對其他檢測通道的干擾更小,在多色熒光分析中是PI 的替代品,可與Annexin V- APC 聯(lián)合使用。 本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細胞凋亡檢測(不推薦用于檢測組織樣本)。 注意事項 1. 微量試劑取用前請離心集液。 2. Annexin V-APC/7-AAD 避光保存及使用。 3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。 4. 本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不推薦用于檢測組織樣本。 5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測??蓪⒁让赶蠹毎谋4嬖诤?%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。 6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。 7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導處理的細胞作為對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
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