Annexin V-PE細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
中文名稱:Annexin V-PE細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱:Annexin V-PE Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20次
本試劑盒是用PE(藻紅蛋白標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測細(xì)胞凋亡時出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰絲氨酸的一種細(xì)胞凋亡檢測試劑盒。一個包裝的本試劑盒共可以檢測20個樣品??梢允褂昧魇郊?xì)胞 儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。本試劑盒檢測的是紅色熒光,因此在待檢測的細(xì)胞已經(jīng)表達(dá)GFP等綠色熒光蛋白的情況下,特別適合使用本試劑盒檢測細(xì)胞凋亡。PE可以被495nm、545或564nm的激發(fā)光所激發(fā),發(fā)出峰值為575nm的熒光。(參考下圖) Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷酯結(jié)合蛋白,參與細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報道可以調(diào)控一些PKC的活性。 Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰絲氨酸(phosphatidylserine,簡稱PS)。磷酯酰絲氨酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期,不同類型的細(xì)胞都會把磷酯酰絲氨酸外翻到細(xì)胞表面,即細(xì)胞膜外側(cè)。磷酯酰絲氨酸暴露到細(xì)胞表面后會促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷酯酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷酯酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。 用帶有紅色熒光的熒光探針PE標(biāo)記的Annexin V,即Annexin V-PE,就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷酯酰絲氨酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。 正常細(xì)胞不會被Annexin V-PE所染色,凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞都會被Annexin V-PE所染色。如果希望進(jìn)一步區(qū)分凋亡和壞死細(xì)胞,可以使用其它細(xì)胞凋亡檢測試劑盒進(jìn)行檢測。 注意事項(xiàng): 1. 如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果。 2. 染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。 3. 如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,最終導(dǎo)致染色失敗。 4. 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。 儲存條件:4℃避光,有效期6個月。
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