"HFLS-RA Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：關節(jié)；成纖維細胞
LC1-Sq細胞系相關產品：SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
BEL 7405細胞系相關產品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
4-1st細胞系相關產品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
SW 982細胞系相關產品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HFLS-RA Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SK-NM-C細胞系相關產品：HUVSMC細胞、WM 2664細胞、SO-Rb 50細胞
MC38細胞系相關產品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
FHC細胞系相關產品：HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
EFM19細胞系相關產品：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
RL-95-2細胞系相關產品：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
細胞生長特性：貼壁
HFLS-RA Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
OSK-1細胞系相關產品：REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
Panc2.03細胞系相關產品：AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞
Capan1細胞系相關產品：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關產品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
NOMO1細胞系相關產品：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞
U373 MG細胞系相關產品：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
Hs737T細胞系相關產品：KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
HFLS-RA Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
293 HEK細胞系相關產品：FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞
H322細胞系相關產品：P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞
H2029細胞系相關產品：CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
SU.86.86細胞系相關產品：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
COLO 320DM細胞系相關產品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
alpha TC1 clone 6細胞系相關產品：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
P3HR1-BL細胞系相關產品：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
SK N SH細胞系相關產品：MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
KLM-1細胞系相關產品：RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞
HT 29細胞系相關產品：TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
GM01232細胞系相關產品：Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞
RPMI 7666細胞系相關產品：DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
Clone 929細胞系相關產品：Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞
KYSE 410細胞系相關產品：ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞
639 V細胞系相關產品：CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
NCI-H2228細胞系相關產品：HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞
LS-411細胞系相關產品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
MB39細胞系相關產品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關產品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
J111細胞系相關產品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
U266-B1細胞系相關產品：PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
TC-1[JHU-1]細胞系相關產品：OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關產品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
LS-411細胞系相關產品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
SW 839細胞系相關產品：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
NCI-BL1339細胞系相關產品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
Fu97細胞系相關產品：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
CDC/EU.HMEC-1細胞系相關產品：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關產品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
H2591細胞系相關產品：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
PL 5細胞系相關產品：U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞
IMCD-3細胞系相關產品：NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
HEK-293-H細胞系相關產品：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
WILL2細胞系相關產品：H-128細胞、CORL279細胞、OVCAR-4細胞
CHP-100細胞系相關產品：PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
TI-73細胞系相關產品：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
2T細胞系相關產品：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞
NCI-H1648細胞系相關產品：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
D341細胞系相關產品：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
EJ細胞系相關產品：Hepa-RG細胞、SNT8細胞、CORL105細胞
SF-763細胞系相關產品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關產品：PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
H2195細胞系相關產品：NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞
HFLS-RA Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
MEF (CF-1)細胞系相關產品：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
SW 579細胞系相關產品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
HEK.EBNA細胞系相關產品：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
IBRS-2細胞系相關產品：Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞
MES 23.5細胞系相關產品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
RS1細胞系相關產品：HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
87MG細胞系相關產品：BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
Clone Y1細胞系相關產品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
RPMI8226細胞系相關產品：TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞
High 5細胞系相關產品：PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
RCCJF細胞系相關產品：HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
Vero E-6細胞系相關產品：OCI-AML4細胞、C3H10T1/2細胞、Hs 343.T細胞
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關鍵字： HFLS-RA Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
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