"RA-FLSs Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：關節(jié)；成纖維細胞
C3H/10T1/2 CL8細胞系相關產(chǎn)品：MT4細胞、NUGC3細胞、MCF.10A細胞
MDA-MB 231細胞系相關產(chǎn)品：HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
NT-2細胞系相關產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
Mono-Mac-1細胞系相關產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RA-FLSs Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H4-II-E細胞系相關產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞
H2052_MM細胞系相關產(chǎn)品：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
NCI-H1668細胞系相關產(chǎn)品：NPA細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞、HOS TE85細胞
COV 434細胞系相關產(chǎn)品：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞
HSF2細胞系相關產(chǎn)品：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
細胞生長特性：貼壁
RA-FLSs Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HCC2157細胞系相關產(chǎn)品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
NUGC4細胞系相關產(chǎn)品：HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞
ROS 17/28細胞系相關產(chǎn)品：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
CPA 47細胞系相關產(chǎn)品：HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
SUM 149細胞系相關產(chǎn)品：Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞
NCI-H1876細胞系相關產(chǎn)品：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
HCC1599細胞系相關產(chǎn)品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
RA-FLSs Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
NCIH345細胞系相關產(chǎn)品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞
A.704細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
KOSC-2 cl3-43細胞系相關產(chǎn)品：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞
NTERA2-D1細胞系相關產(chǎn)品：TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關產(chǎn)品：NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
HME-1細胞系相關產(chǎn)品：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
Detroit562細胞系相關產(chǎn)品：NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
95-D細胞系相關產(chǎn)品：Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞
Hs-343-T細胞系相關產(chǎn)品：FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞
Hs-343-T細胞系相關產(chǎn)品：FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞
VMM5細胞系相關產(chǎn)品：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
HCe-8693細胞系相關產(chǎn)品：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
HCC-1500細胞系相關產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
NCIH295R細胞系相關產(chǎn)品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
H-157細胞系相關產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
HeLa.S3細胞系相關產(chǎn)品：ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞
LAN6細胞系相關產(chǎn)品：TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
WERI細胞系相關產(chǎn)品：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關產(chǎn)品：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞
H-1184細胞系相關產(chǎn)品：MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞
SNU-407細胞系相關產(chǎn)品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
6-10B細胞系相關產(chǎn)品：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
EOL1細胞系相關產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
MJ細胞系相關產(chǎn)品：RN細胞、NCI-SNU-119細胞、Jurkat-FHCRC細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
MHCC97H細胞系相關產(chǎn)品：Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
IAR20細胞系相關產(chǎn)品：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
SMA560細胞系相關產(chǎn)品：Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
hEEC細胞系相關產(chǎn)品：Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
NHLF細胞系相關產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
HEK293-EBNA1細胞系相關產(chǎn)品：16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞
HCT 15細胞系相關產(chǎn)品：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
PL-5細胞系相關產(chǎn)品：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
SW1088細胞系相關產(chǎn)品：P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞
H378細胞系相關產(chǎn)品：McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞
Baby Hamster Kidney-21細胞系相關產(chǎn)品：UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞
AtT 20細胞系相關產(chǎn)品：HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
H295R細胞系相關產(chǎn)品：Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關產(chǎn)品：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
FTC-133細胞系相關產(chǎn)品：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
FTC-133細胞系相關產(chǎn)品：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
MC3T3E1細胞系相關產(chǎn)品：Panc10.05細胞、RH7777細胞、UT7細胞
MUVEC細胞系相關產(chǎn)品：SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞
RA-FLSs Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
CORL88細胞系相關產(chǎn)品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
CCF-STTG1細胞系相關產(chǎn)品：MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
T-98細胞系相關產(chǎn)品：SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
HSAS1細胞系相關產(chǎn)品：hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞
H-2135細胞系相關產(chǎn)品：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
NCIH2106細胞系相關產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
Tu 177細胞系相關產(chǎn)品：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
NCI-H-128細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
Roswell Park Memorial Institute 1788細胞系相關產(chǎn)品：EM3細胞、SGC7901/DDP細胞、C3H10T1/2細胞
BHK-21細胞系相關產(chǎn)品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
HCV-29細胞系相關產(chǎn)品：E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
H1915細胞系相關產(chǎn)品：MNNG/HOS細胞、H748細胞、T_T_細胞
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關鍵字： RA-FLSs Cell:類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
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