"H4 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 細胞背景資料:H4細胞系建系于1973年。它衍生于一個患神經(jīng)膠質(zhì)瘤的37歲病人的腦組織。該細胞的致瘤特性己經(jīng)被屏蔽,細胞接種動物一般不產(chǎn)生腫瘤結(jié)節(jié)。該細胞具有修復(fù)MNNG損傷5型腺病毒的能力。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞 NCIH1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞 201T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞 細胞生長:貼壁 H4 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細胞傳代方法:1:3傳代,每周換液2-3次。 HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞 NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞 NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞 YES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞 P3J HR1-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 H4 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 NCIH2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞 HcerEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞 JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞 RWPE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞 KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞 IHH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞 NCI-H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞 Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞 624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞 MX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞 H4 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞 OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞 HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞 H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞 Hut292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞 HT-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞 HT-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞 HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞 OVCAR-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞 GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞 NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞 TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞 COLO206細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6-M1細胞、H-II-E-C3細胞、SU-DHL-16細胞 CAL 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞 JROECL19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞 GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞 HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞 H-1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞 HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞 NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞 COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞 COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞 NCI-H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL28細胞、L1210細胞、SCC-4細胞 Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞 FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞 NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞 Panc 02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞 Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞 SPDC-CCL141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞 CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細胞、L540細胞、74Int細胞 RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞 Hs940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞 SW 1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2/D1細胞、Hs888T細胞、ECV 304細胞 NK 10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞 A704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞 RIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AKR細胞、H-2081細胞、H8細胞 1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞 HEK293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞 Karpas-422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞 GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞 MDA231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞 B16F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞 H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞 RPTEC/TERT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞 D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞 NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞 GM01232細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞 RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞 M-1 myeloid leukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞 NB19-RIKEN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞 H4 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 SUM52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞 SW480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEpiC細胞、3-LL細胞、ECC10細胞 Panc 5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WBF344細胞、Hs-675-T細胞、IM9細胞 JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細胞、LAC細胞、LY-R細胞 "
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