"SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細胞系 細胞背景資料:這株細胞與HTB-11都是神經(jīng)源的。1971年9月分離得到SK-N-MC后,發(fā)現(xiàn)它有中性多巴胺-β-羥化酶活性,也有細胞內(nèi)兒茶胺,用甲醛可以誘導出熒光。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 WB F344細胞系相關產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞 Ketr-3細胞系相關產(chǎn)品:C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞 HOSEpiC細胞系相關產(chǎn)品:Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞 細胞生長:貼壁 SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:6-1:12傳代,每周2-3次換液。 HLEB-3細胞系相關產(chǎn)品:MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞 MDA468細胞系相關產(chǎn)品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞 HT-55細胞系相關產(chǎn)品:BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞 LC-2 ad細胞系相關產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞 IGROV1細胞系相關產(chǎn)品:NCI.H226細胞、GH3細胞、SW982細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。 MV(4;11)細胞系相關產(chǎn)品:PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞 C22 (Clara)細胞系相關產(chǎn)品:EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞 H1944細胞系相關產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞 293AD細胞系相關產(chǎn)品:AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞 P815細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞 H650細胞系相關產(chǎn)品:K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞 aTC1 Clone 6細胞系相關產(chǎn)品:D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞 N1E115細胞系相關產(chǎn)品:ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞 HCC-95細胞系相關產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞 TE5細胞系相關產(chǎn)品:MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞 SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細胞系 D6P2T細胞系相關產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞 LLC-PK(1)細胞系相關產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞 ME16C細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞 H-1568細胞系相關產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞 HNE-2細胞系相關產(chǎn)品:KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞 T. T細胞系相關產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞 COV504細胞系相關產(chǎn)品:H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞 B95.8細胞系相關產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞 SNU354細胞系相關產(chǎn)品:NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞 RWPE-2細胞系相關產(chǎn)品:C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞 BEND細胞系相關產(chǎn)品:SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞 MDA-468細胞系相關產(chǎn)品:HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞 NU-GC-2細胞系相關產(chǎn)品:NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞 CHO-Lec1細胞系相關產(chǎn)品:H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞 MC/CAR細胞系相關產(chǎn)品:A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞 NE1細胞系相關產(chǎn)品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞 207細胞系相關產(chǎn)品:CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞 CA922細胞系相關產(chǎn)品:MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞 alpha-TC1-6細胞系相關產(chǎn)品:SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞 HT-29細胞系相關產(chǎn)品:HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞 EB-2細胞系相關產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞 LX-2細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞 751-NA-15細胞系相關產(chǎn)品:SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞 MDA-MB-231-GFP細胞系相關產(chǎn)品:EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞 MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品:MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞 HOS TE85細胞系相關產(chǎn)品:Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞 GAK細胞系相關產(chǎn)品:RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞 NCIH226細胞系相關產(chǎn)品:H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞 SEG-1細胞系相關產(chǎn)品:H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞 Hs688(A)T細胞系相關產(chǎn)品:WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞 HCC202細胞系相關產(chǎn)品:NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞 CaSki細胞系相關產(chǎn)品:HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞 293/EBNA細胞系相關產(chǎn)品:LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞 CEM T4細胞系相關產(chǎn)品:DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞 Alpha Mouse Liver 12細胞系相關產(chǎn)品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞 NCI-H2066細胞系相關產(chǎn)品:Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞 NCI-H102細胞系相關產(chǎn)品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞 Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關產(chǎn)品:QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞 Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關產(chǎn)品:QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞 P3X63NS1細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞 HCC1937細胞系相關產(chǎn)品:JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞 CAL62細胞系相關產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞 P3X63Ag8細胞系相關產(chǎn)品:HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞 A 253細胞系相關產(chǎn)品:P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞 ME 180細胞系相關產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞 AG06814-N細胞系相關產(chǎn)品:H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞 huH 1細胞系相關產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞 H292細胞系相關產(chǎn)品:SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞 CLONE M3細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞 OCI-LY-19細胞系相關產(chǎn)品:CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞 HCC-9724細胞系相關產(chǎn)品:LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞 SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細胞系 293T/17細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞 SK-MEL-2-LUC細胞系相關產(chǎn)品:VE細胞、McCoy細胞、RSC-364細胞 KE 37細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、OPM2細胞、C33A細胞 H-1930細胞系相關產(chǎn)品:PaCa2細胞、HCC1428細胞、RT4-D6P2T細胞 "
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