"SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:這株細(xì)胞與HTB-11都是神經(jīng)源的。1971年9月分離得到SK-N-MC后,發(fā)現(xiàn)它有中性多巴胺-β-羥化酶活性,也有細(xì)胞內(nèi)兒茶胺,用甲醛可以誘導(dǎo)出熒光。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞 Ketr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞 HOSEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Toledo細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞、P-36細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:6-1:12傳代,每周2-3次換液。 HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、U266B1細(xì)胞 MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞 HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞 LC-2 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞 IGROV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長,及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 MV(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞 C22 (Clara)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192C細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞 H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞 293AD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞 P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞 H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞 aTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407 RPE細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞、4T1細(xì)胞 N1E115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST-2細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞 HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞 TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞、TE-5細(xì)胞 SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞系 D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞 LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞 ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞 H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞 HNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN-8細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞 T. T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞 COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞 B95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細(xì)胞、HT29細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞 SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞 RWPE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞 BEND細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-Rh 30細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞 MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞 NU-GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-460細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞 CHO-Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞 MC/CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2058細(xì)胞、A 72細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞 NE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 180細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOS細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞 CA922細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT4細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞 alpha-TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-527細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞、SLK細(xì)胞 HT-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞 EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞 LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞 751-NA-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA-560細(xì)胞、SW 480細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞 MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞 MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞 HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞 GAK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞 NCIH226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細(xì)胞、LTPA細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞 SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞 Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞 HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞 CaSki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF2細(xì)胞、EL 4細(xì)胞、KMS26細(xì)胞 293/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞 CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL5細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞 Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞 NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞 NCI-H102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞 Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞 Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞 P3X63NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 30細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞、VP 267細(xì)胞 HCC1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 21細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞、DMS53細(xì)胞 CAL62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞 P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞 A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞 ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞 AG06814-N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-838細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞、TE8細(xì)胞 huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞 H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU620細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞 CLONE M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、A3細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞 OCI-LY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-18Co細(xì)胞、A-427細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞 HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞 SK-N-MC epithelioid cells人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞系 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞、H1693細(xì)胞 SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VE細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞 KE 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、C33A細(xì)胞 H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞 "
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